论文部分内容阅读
L-肉碱的主要功能是作为载体将长链脂肪酸从线粒体膜外运送到膜内,促进脂肪酸的氧化,同时还调节线粒体内酰基CoA/CoA比率,增强支链氨基酸的代谢等.本论文研究了日粮中添加L-肉碱对母猪胎盘GLUT-1和IGF系统相关基因mRNA及蛋白表达的影响,旨在结合饲养试验的结果揭示L-肉碱对母猪繁殖性能的作用机制.动物试验选择了遗传一致、胎次3~5胎的长大二元母猪40头,随机分为对照组(0mg/kg L-肉碱)和试验组(50mg/kg L-肉碱),每组20头母猪.每组各选取9头母猪,于产后胎盘自然排出时,将胎盘置于干净托盘上,把胎盘绒毛膜上黏附的粪粒用生理盐水冲洗掉,从脐带以上10cm处采集一块2cm×2cm的绒毛膜组织,每头母猪采集3份绒毛膜样本,标记清楚,放入盛有福尔马林的塑料瓶中,制作切片以检测胎盘的组织学特点.同时将胎盘绒毛膜上黏附的杂物用DEPC灭菌水冲洗掉,用消毒好的镊子、盖玻片从脐带以上5cm处轻轻刮取胎盘绒毛膜,装入经DEPC处理过的1.5ml灭菌管内.每个胎盘采集样本3份,做好标记后投入液氮中保存,之后转入-80℃冰箱保存备用,用于分子生物学测定.结果显示:通过组织切片观察发现,添加L-肉碱的母猪胎盘绒毛膜上皮完整、结构清晰,毛细血管未见淤血、坏死等变化,而没有添加L-肉碱的母猪胎盘绒毛膜上皮可见缺损,部分区域出现上皮坏死及渗出变化、形成小血栓,因此,添加L-肉碱促进了母猪胎盘绒毛膜的发育和完整性.荧光定量PCR结果显示,L-肉碱显著上调了母猪胎盘绒毛膜中IGF-1mRNA的表达水平(P<0.05),GLUT-1 mRNA表达量有上调趋势(P<0.1),一定程度上上调了IGF-2和IGFBP-3两个基因的mRNA表达量(P>0.05).Western blot免疫印迹结果显示,L-肉碱显著上调了母猪胎盘绒毛膜IGF-1的蛋白表达量(P<0.05),极显著上调了IGF-2的蛋白表达量(P<0.01),GLUT-1蛋白表达量有上调趋势(P<0.1).结果表明L-肉碱可以提高母猪胎盘绒毛膜中GLUT-1和IGF系统的mRNA和蛋白表达水平,促进胎盘发育和完整性,增强胎盘养分转运功能.