L-肉碱对母猪胎盘GLUT-1和IGF系统相关基因mRNA及蛋白表达的影响

来源 :中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lihaiyun718
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  L-肉碱的主要功能是作为载体将长链脂肪酸从线粒体膜外运送到膜内,促进脂肪酸的氧化,同时还调节线粒体内酰基CoA/CoA比率,增强支链氨基酸的代谢等.本论文研究了日粮中添加L-肉碱对母猪胎盘GLUT-1和IGF系统相关基因mRNA及蛋白表达的影响,旨在结合饲养试验的结果揭示L-肉碱对母猪繁殖性能的作用机制.动物试验选择了遗传一致、胎次3~5胎的长大二元母猪40头,随机分为对照组(0mg/kg L-肉碱)和试验组(50mg/kg L-肉碱),每组20头母猪.每组各选取9头母猪,于产后胎盘自然排出时,将胎盘置于干净托盘上,把胎盘绒毛膜上黏附的粪粒用生理盐水冲洗掉,从脐带以上10cm处采集一块2cm×2cm的绒毛膜组织,每头母猪采集3份绒毛膜样本,标记清楚,放入盛有福尔马林的塑料瓶中,制作切片以检测胎盘的组织学特点.同时将胎盘绒毛膜上黏附的杂物用DEPC灭菌水冲洗掉,用消毒好的镊子、盖玻片从脐带以上5cm处轻轻刮取胎盘绒毛膜,装入经DEPC处理过的1.5ml灭菌管内.每个胎盘采集样本3份,做好标记后投入液氮中保存,之后转入-80℃冰箱保存备用,用于分子生物学测定.结果显示:通过组织切片观察发现,添加L-肉碱的母猪胎盘绒毛膜上皮完整、结构清晰,毛细血管未见淤血、坏死等变化,而没有添加L-肉碱的母猪胎盘绒毛膜上皮可见缺损,部分区域出现上皮坏死及渗出变化、形成小血栓,因此,添加L-肉碱促进了母猪胎盘绒毛膜的发育和完整性.荧光定量PCR结果显示,L-肉碱显著上调了母猪胎盘绒毛膜中IGF-1mRNA的表达水平(P<0.05),GLUT-1 mRNA表达量有上调趋势(P<0.1),一定程度上上调了IGF-2和IGFBP-3两个基因的mRNA表达量(P>0.05).Western blot免疫印迹结果显示,L-肉碱显著上调了母猪胎盘绒毛膜IGF-1的蛋白表达量(P<0.05),极显著上调了IGF-2的蛋白表达量(P<0.01),GLUT-1蛋白表达量有上调趋势(P<0.1).结果表明L-肉碱可以提高母猪胎盘绒毛膜中GLUT-1和IGF系统的mRNA和蛋白表达水平,促进胎盘发育和完整性,增强胎盘养分转运功能.
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