农杆菌介导的轮枝镰孢GFP和DsRed遗传转化及转化子特性分析

来源 :中国植物病理学会2010年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wxbft
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  轮枝镰孢(Fusarium verticillioides)是世界范围内危害严重的植物病原真菌之一,能够侵染包括玉米在内的十几个科的植物。这种真菌不仅能侵染玉米的穗、茎、根,引起玉米穗腐病、苗枯病、茎腐病等,还能像内生菌一样存活在植株体内而又不引起病症出现。本研究通过农杆菌介导方法,利用gfp和DsRed两种荧光蛋白基因对轮枝镰孢进行遗传转化,比较了两种荧光蛋白基因对转化子的影响。受体茵是从吉林省玉米病株上分离的轮枝镰孢。经农杆菌活化、预培养、共培养、转膜和筛选等步骤及条件的优化,获得转化子。用抗潮霉素基因、gfp和DsRed基因的特异引物进行PCR扩增,均获得目的基因扩增片段。对经过PCR鉴定的转化子进行遗传稳定性分析,转化子在PDA培养基上继代5次后,仍能在含潮霉素的选择性培养基上正常生长,表明转化子的目的基因能够稳定遗传。
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