【摘 要】
：
目的：了解安徽三界地区恙螨媒介种类,东方体的基因型别,并对其56kD蛋白部分片段进行克隆表达,为下一步研制诊断试剂提供诊断抗原.方法：将三界地区捕获的恙螨分类、制成研磨液,接种小白鼠分离病原体.PCR扩增恙螨分离株东方体56kD蛋白部分基因,并将目的片段进行测序,基因序列同源性及进化分析.将约730bp东方体56kD截短蛋白基因的克隆至载体pET28a并进行转化及诱导表达.结果：鉴别当地优势恙螨为
【机 构】
：
南京军区军事医学研究所,210002
【出 处】
：
21世纪第五届全国人兽共患病学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：了解安徽三界地区恙螨媒介种类,东方体的基因型别,并对其56kD蛋白部分片段进行克隆表达,为下一步研制诊断试剂提供诊断抗原.方法：将三界地区捕获的恙螨分类、制成研磨液,接种小白鼠分离病原体.PCR扩增恙螨分离株东方体56kD蛋白部分基因,并将目的片段进行测序,基因序列同源性及进化分析.将约730bp东方体56kD截短蛋白基因的克隆至载体pET28a并进行转化及诱导表达.结果：鉴别当地优势恙螨为临淮岗纤恙螨,从媒介接种的小鼠中分离到恙虫病东方体,命名为SJ2,并扩增出Ot 56kD部分基因.序列BLAST表明该株东方体与韩国young-worl株同源性最高为99％.系统发生树分析也显示,SJ2和young-worl株在同一分支.56kD截短蛋白克隆、诱导表达后电泳在30KDa处出现明显条带,证明诱导表达成功.结论：安徽三界地区临淮岗恙螨可能为当地恙虫病媒介,恙螨分离株基因型与韩国young-worl株亲缘性相近.成功诱导表达的重组56kD部分蛋白可作为诊断抗原用于进一步研制恙虫病诊断试剂.
其他文献
目的：五热日巴尔通体(Bartonella quintana)由体虱在人群中传播,可引起战壕热、心内膜炎和杆菌性血管瘤等疾病.以往认为人类是唯一宿主,近年,国内外先后在食蟹猕猴和普通猕猴中发现这种巴尔通体.为进一步证实猕猴可作为五热日巴尔通体的自然宿主,本研究调查了来自国内4个地区、550只猕猴五热日巴尔通体的感染状况,并对菌株遗传特征进行了分析.方法：采集北京、四川、广东和云南实验用猕猴全血和血
本研究利用overlap-PCR技术将H7N9亚型禽流感病毒血凝素球状部(HAl-2，aa62-284)基因连接到鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因fliC）的N端，获得目的基因片段HAI-2iQfC(2187bp)，另外还单独扩增了HAl-2片段(669bp)。将它们分别与pCold载体连接、转化，通过大肠杆菌表达系统表达出HAl-2-fliC和HAl-2蛋白。SDS-PAGE结果显示大肠杆菌表达系统能够
耐药基因通常位于可移动元件上，携带耐药决定子的质粒是传播耐药性的重要途径，全基因组测序分析在耐药基因型确定和预测耐药表型中可能成为一种简单、快速和高效的方法，并且有较高的灵敏度和特异度。通过分析50株鸡白痢沙门菌的全基因组序列，获得一个新的耐药质粒pSPUR，目前在鸡白痢沙门菌中未见报道。该质粒仅存在于对氨苄西林的MIC值>512μg/mL的菌株(s9303，s9804，s98109，s09c6，
目的 树突状细胞(Dendritic cells,DCs)在机体抗分枝杆菌免疫应答中发挥关键作用,但是由于数量稀少、制备困难等原因,不同亚型DCs在分枝杆菌免疫应答中的功能了解相对较少.本研究通过小鼠Flt3配体(Flt3 ligand,FL)诱导制备FL-cDC和-pDC亚型,对其在BCG体外感染早期的免疫应答特性进行分析,以期增加对不同亚型DC在分枝杆菌免疫应答中的作用的了解.方法 使用FL蛋
目的 利用噬菌体展示随机12肽库筛选结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的模拟表位,检测其在结核病血清学诊断中的应用价值,为制备灵敏、特异的结核病诊断试剂奠定基础.方法 以初步纯化的结核病人阳性血清为靶分子,对噬菌体展示随机12肽库进行3轮生物淘选,再以阴性血清为靶分子,对文库进行2轮负筛选以去除非特异噬菌体.收集淘选后的噬菌体进行扩增培养,利用碘化钠法提取
A safe and effective Hantaan virus (HTNV) vaccine is highly desirable because HTNV causes an acute and often fatal disease (hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS).Because inactivated HTNV vaccin
背景:结核病新型疫苗的研制对该病的有效防控至关重要.亚单位蛋白疫苗因为组成成份明确,具有良好的安全性,最受重视.机体抗结核分枝杆菌的感染主要依靠Th1型细胞免疫应答,因此,发展有效的结核病亚单位蛋白疫苗,必须要依赖能刺激Th1型细胞免疫反应的佐剂.但是,国内、外尚无适宜的佐剂.前期,我们已建立一种Th1型细胞免疫反应的佐剂MTO(Wang X,etal.Plos One,2015),本研究拟进一步
单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种典型的食物源性人兽共患病病源菌,被列为食品中的四大病源菌之一。近年来由该病源菌引起的食物中毒案例呈上升趋势,因此有关Lm的各个方面的研究都备受重视。对Lm致病机理的研究发现,一种分子量约为60kD的蛋白(简称p60蛋白)在Lm侵染宿主和细胞扩张过程中起着重要作用,p60蛋白对细胞壁的裂解,可以帮助Lm逃避宿主的先天免疫
目的 通过对陆良县2013年1月发生的一起布鲁氏菌病爆发疫情的流行病学调查,掌握其流行规律,确定陆良县布病疫情流行程度,查找传染源,切断传播途径,提出防控措施,为制定疫区人间布鲁氏菌病防治策略提供科学依据 方法 对报告的首例病例及其他病例进行实验室核实和流行病学个案调查,对感染源进行筛查,对该乡镇的职业人群、密切接触者进行,及患者家属进行流行病学调查和实验室检测；对发生人间布病的大莫古镇和小百户镇
目的 凋亡是机体抵御病原体侵入、致病的重要调节防御机制.实验通过人重组干扰素-γ(recombinant human IFN-γ,rhIFN-γ)诱导鹦鹉热嗜衣原体(Chlamyidopila psittaci,Cps)持续性感染HeLa细胞,研究宿主细胞凋亡抑制作用产生机制,监测宿主细胞凋亡相关蛋白表达情况以及凋亡信号通路,并初步了解Cps持续性感染抑制凋亡相关途径.因此,该实验对探索Cps抑制