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研究目的:久坐行为是指在坐姿、斜倚或仰卧姿势时,能量消耗≤1.5MET为特征的任何清醒行为。近年新的研究表明,活跃个体仍然可能属于久坐行为人群,比如有个体是活跃的,并且达到或超过了体育活动建议的150分钟/周的中等强度活动,但他们大部分醒着的时间都是在久坐状态,此种久坐行为仍旧是独立的健康风险因素。大量研究表明,久坐行为与许多不良健康结果相关,体育活动和锻炼对免疫系统有深远的影响。虽然久坐行为对健康的不良影响已经在成年人中得到了明确的证明,但这些研究中大多数研究对象并不包括像大学生这样的年轻人。同时,规律运动对大学生人群免疫系统表型和功能的影响极少有文献记载。本研究探讨了12周健步走对久坐大学生外周血免疫细胞数量以及先天性免疫和适应性免疫细胞增殖、分化以及功能的影响。研究方法:以12名久坐不动的大学生(年龄24.2±1.6岁,男性5名,女性7名)为研究对象进行了为期3个月的健步走锻炼,运动方式为每天走5KM,在40-50min完成,运动过程中心率控制在120-140bpm,每隔一天锻炼一次。在基线和90天步行锻炼后第二天上午静脉采血,对受试者适应性和先天性免疫特性进行了计数和分析。将受试者外周血单个核细胞(PBMCs)重悬于BSA,加入特异性表面抗体,孵育20分钟后离心去上清,StainBuffer重悬细胞,通过流式细胞技术检测T细胞及分化状态(na?ve/effector/memory T cell)、B细胞计数、NK细胞活化分型及功能、单核-巨噬细胞分型。取外周血单个核细胞(PBMCs)加入PBS清洗,离心弃上清,PBS重悬后加入表面荧光抗体(CD3+CD4+),清洗后固定细胞、破膜处理,胞内因子染色后上流式细胞仪检测Th细胞、Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞和IFN-γ;通过表染、清洗、固定破膜后胞内因子染色上流式细胞仪检测Treg。研究结果:(1)12周健步走对外周血细胞组成的影响:健步走运动引起外周血中单核细胞和淋巴细胞数量明显增加(t=3.469,P=0.002<0.01;t=3.733,P=0.005<0.01),白细胞无显著变化(t=0.739,P=0.736>0.05);在淋巴细胞内,B细胞数量显著增加(t=3.938,P=0.004<0.01)、T细胞、NK细胞数值增加,但是训练前后无统计学(t=1.936,P=0.066>0.05;t=0.975,P=0.341>0.05)。(2)12周健步走对T细胞分化状态的影响:健步走运动后外周血中CD4+na?veT细胞(CD4+Tna?ve)、CD4+effectorT细胞(CD4+Teffector)显著增加(t=15.149,P=0.000<0.01;t=5.182,P=0.003<0.01),关于CD4+memory T细胞的变化,中央型记忆CD4+T细胞(CD4+TCM)运动后较运动前数值增加但无统计学意义(t=1.186,P=0.079>0.05)、效应型记忆CD4+T细胞(CD4+TEM)有上升,运动前后有显著性差异(t=1.897,P=0.011<0.05);CD8+na?ve T细胞(CD8+Tna?ve)运动后数值增加但是前后对比无统计学差异(t=2.762,P=0.347>0.05),CD8+effectorT细胞(CD8+Teffector)运动前后增加但无统计学意义(t=0.501,P=0.622>0.05),CD8+memoryT细胞的变化,中央型记忆CD8+T细胞(CD8+TCM)数值略有增加但无统计学意义(t=1.310,P=0.204>0.05)、效应型记忆CD8+T细胞(CD8+TEM)比运动前下降,前后有非常显著性差异(t=3.126,P=0.007<0.01)。(3)12周健步走对T细胞免疫应答功能的影响:进一步的T细胞分化分析显示,CD3+CD4+T细胞(Th细胞)运动前后总数增加不明显(t=0.279,P=0.784>0.05),但是Th1/Th2比值有明显增加,Th17水平明显高于训练前,前后对比有非常显著性变化(t=5.559,P=0.000<0.01);CD3+CD8+T细胞(Tc细胞)运动前后有显著性增加(t=2.465,P=0.022<0.05),CD3+CD4+CD25+CD127+T细胞(Treg细胞)运动前后无显著变化(t=0.747,P=0.465>0.05)。(4)12周健步走对NK细胞分型及功能的影响:早期NK细胞数量运动后下降,中期NK细胞无变化,两者运动前后均无显著性差异(t=1.079,P=0.292>0.05;t=0.252,P=0.803>0.05),成熟的NK细胞有显著增加(t=3.687,P=0.002<0.01),终末分化期NK细胞无变化(t=0.610,P=0.548>0.05);INF-γ水平明显低于训练前,前后对比有显著性变化(t=3.639,P=0.002<0.01)。研究结论:(1)12周健步可以提高久坐大学生外周血中单核细胞和淋巴细胞数量,其中淋巴细胞数量增加以B细胞增加数量为主,说明12周健步可以提高久坐大学生体液免疫功能。(2)12周健步走可以促进久坐大学生外周血Th细胞的增殖和分化能力;该运动对CD4+effector T细胞的影响大于CD8+effector T细胞,提示外周血中B细胞增加的原因可能是CD4+effectorT细胞数量增加所致;12周健步走同时可以提高机体识别和杀伤特定病毒能力,可以提高机体免疫记忆功能。(3)12周健步使得久坐大学生机体向促炎性反应偏移,促进细胞外病原体的炎性反应及防御反应。(4)12周健步走可以促进久坐大学生NK细胞的活化,提高机体抗肿瘤、抗感染的潜能,但是是否能够调节机体免疫系统中的其它免疫细胞功能尚需进一步研究。