海洋微生物蛋白酶MP的晶体结构与分子改造

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  海洋微生物蛋白酶MP是一种适应温度在20-30℃范围内活性基本不变的碱性蛋白酶,该酶具有低温活性高、抗氧化、与复杂试剂配伍性好等优点,这些独特性能在天然酶中是罕见的.但在高温下酶性质不稳定.通过蛋白质晶体学获得了蛋白酶MP的晶体结构(PDB号3U1R)和结构基础,MP晶体为斜状晶体,含463个氨基酸;整体结构中主要表现为几个环的位置向蛋白内移动,含有一个锌离子、两个氯离子和八个钙离子的N端结构域和C端结构域,N端结构域是蛋白水解结构域,含有结合锌离子活性位点,C端结构域是从248至463残基的一个平行β卷结构和七个结合钙离子,结合在平行β卷结构的核心.通过对晶体结构的分析,设计了突变位点,得到了二株突变体,其稳定性能与原始酶相比提高了4-5℃.
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