【摘 要】
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壳寡糖是一种具有诸多生理活性的功能性低聚糖,在食品、医药、化妆品等领域有着广泛的应用。酶法制备壳寡糖有反应条件温和、容易控制、安全性高和环境污染少等优点,是工业化
【机 构】
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华东理工大学生物工程学院发酵工业分离提取技术研发中心生物反应器国家重点实验室;
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壳寡糖是一种具有诸多生理活性的功能性低聚糖,在食品、医药、化妆品等领域有着广泛的应用。酶法制备壳寡糖有反应条件温和、容易控制、安全性高和环境污染少等优点,是工业化制备壳寡糖最有效的方法。本研究从解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens中克隆得到了一个新型糖苷水解酶46家族壳聚糖酶基因,并在毕赤酵母中高效表达。该酶具有729 bp的开放阅读框,编码242个氨基酸。重组酶在发酵罐（5L）中进行高密度发酵,胞外总蛋白浓度为4.2 g·L-1,壳聚糖酶活性达到4314 U·mL-1。SDS-PAGE分析该酶的蛋白分子量约为29.0 kDa。该酶的最适反应pH值和最适反应温度分别为pH 6.5和55℃,在65℃以下保持稳定。利用毕赤酵母高效分泌表达制备壳聚糖酶成为该酶工业应用的理想选择。
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