【摘 要】
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目的：建立可同时检测单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1、HSV-2)、水痘-带状疱疹病毒(VZV)、人巨细胞病毒(CMV)、爱泼斯坦-马尔病毒(EBV)和人类疱疹病毒6型(HHV-6A、HHV-6B)等多种人
【机 构】
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浙江大学医学院附属儿童医院中心实验室,310003
【出 处】
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2007年浙江省医学病毒、微生物学和免疫学学术会议
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目的：建立可同时检测单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1、HSV-2)、水痘-带状疱疹病毒(VZV)、人巨细胞病毒(CMV)、爱泼斯坦-马尔病毒(EBV)和人类疱疹病毒6型(HHV-6A、HHV-6B)等多种人疱疹病毒的多重PCR-基因芯片技术。
方法：以人疱疹病毒DNA多聚酶基因区为靶序列，设计引物及寡核苷酸探针，并将探针固定于经特定修饰的玻片上，制成基因芯片；标本经PCR扩增并CY5荧光标记后，与基因芯片进行杂交，洗脱后激光扫描读片。
结果：7种人疱疹病毒经PCR扩增后产物为224-252bp，与基因芯片杂交后可鉴别分型，其最低检出浓度为101拷贝/μl，细菌、真菌、乙肝病毒及人基因组DNA等无交叉反应。用该多重PCR-基因芯片技术对临床疑为病毒感染的129份血标本进行检测，共检出48份阳性标本，与TaqMan荧光定量PCR法比较，其敏感度为95.6％，特异度为98.8％，且5份阳性标本的测序结果均与检测结果相符，35例正常健康儿童的血标本检测均为阴性。
结论：建立的多重PCR-基因芯片技术，可同时检测7种人疱疹病毒，且特异敏感、快速简便，可望为临床早期、准确诊断人疱疹病毒的感染提供有效方法。
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