【摘 要】
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目的:研究腺相关病毒(recombinantadeno-associatedvirusrAAV)载体介导的绿色荧光蛋白(greenfluorescentproteinGFP)基因对体外原代培养的神经干细胞(neuralstemcellsNSCs)的
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第一医院立体定向功能神经外科,哈尔滨,150001
【出 处】
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第七届全国立体定向和功能性神经外科学术会议
论文部分内容阅读
目的:研究腺相关病毒(recombinantadeno-associatedvirusrAAV)载体介导的绿色荧光蛋白(greenfluorescentproteinGFP)基因对体外原代培养的神经干细胞(neuralstemcellsNSCs)的转染效率及其对细胞增值、分化和迁移能力的影响.方法:取新生24h内的Wistar鼠的海马进行神经干细胞原代培养,用MTT法测定不同病毒滴度下对NSCs增值能力的影响;用免疫组化的方法进行NSCs、神经元及神经胶质细胞的鉴定和直接倒置荧光显微镜下细胞迁移距离的测定.结果:rAAV2-EGFP对NSCs的转染效率随着病毒滴度的增加而增加,在转染后的第11天效率最高,MOI=104、105、106在转染后的第11天分别是9.81％、56.30％、64.67％;不同病毒滴度转染NSCs后,MTT法测定的OD值,在不同的时间点随着病毒滴度的增加,OD值均明显减小,各组之间在不同的时间点均有显著的统计学差异;但不同滴度的rAAV2-EGFP转染NSCs,其分化为神经元和神经胶质细胞的比率以及迁移的距离,各组间无统计学差异.结论:rAAV2-EGFP转染NSCs,在MOI=105,106时,转染率较高,转染后第11天达到高峰,且不影响NSCs的分化和迁移能力,但对NSCs增殖能力有明显影响,其随着病毒滴度的增加,其影响程度亦明显增加.
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