【摘 要】
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目的： 探索microRNA-519b-3p(miR-519b-3p)对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响及其在喉癌发生发展过程中的作用及机制. 方法： 通过MTT和流式细胞术分别检测转染miR-519b-3p
【机 构】
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宁波市医疗中心李惠利医院耳鼻咽喉头颈外科
【出 处】
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2013浙江省医学会耳鼻咽喉头颈外科学学术年会
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目的：
探索microRNA-519b-3p(miR-519b-3p)对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响及其在喉癌发生发展过程中的作用及机制.
方法：
通过MTT和流式细胞术分别检测转染miR-519b-3p类似物前后Hep-2细胞生长和细胞周期的变化,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western-blot)分别在mRNA和蛋白水平检测细胞中相关基因和蛋白的表达.实时定量RT-PCR技术检测48对喉癌组织及癌旁组织中miR519b-3p的表达水平.
结果：
miR-519b-3p类似物能显著抑制Hep-2细胞的增殖,并明显减少S期细胞,使细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin dependent kinase 1,CDK1)表达显著增加,而显著抑制CDK2和细胞周期蛋白A(Cyclin A)的表达.RT-PCR和Western-blot结果显示,miR-519b-3p类似物在不影响HuR和环氧化酶-2(Cyclooxgenase-2,COX-2)mRNA表达水平情况下,却明显下调其蛋白表达水平.喉癌组织中miR-519b-3p的表达水平明显低于癌旁组织(t=2.693,P＜0.01).
结论：
miR-519b-3p在喉癌组织中低表达,它可能作为抑癌因子通过翻译后抑制HuR和COX-2的表达而使细胞周期S期减少,从而抑制细胞生长.
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