【摘 要】
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【目的】已有研究表明多种原虫（阿米巴原虫、克氏锥虫、艾美尔球虫、恶性疟原虫、刚地弓形虫等）具有抗肿瘤作用[1-4],但其相关抗肿瘤机制还没有阐明。因此,本研究采用斯氏艾美尔球虫进一步研究原虫的抗肿瘤效果并探究其免疫学机制。【方法】本实验选取兔致病力最强的斯氏艾美尔球虫（E.stiedai）孢子化卵囊（10~8个）,经研磨、超声破碎、离心后获得卵囊可溶性蛋白（ESSP）。6-7周龄BALB/c小鼠前
【机 构】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会论文集
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会论文集
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【目的】已有研究表明多种原虫（阿米巴原虫、克氏锥虫、艾美尔球虫、恶性疟原虫、刚地弓形虫等）具有抗肿瘤作用[1-4],但其相关抗肿瘤机制还没有阐明。因此,本研究采用斯氏艾美尔球虫进一步研究原虫的抗肿瘤效果并探究其免疫学机制。【方法】本实验选取兔致病力最强的斯氏艾美尔球虫（E.stiedai）孢子化卵囊（10~8个）,经研磨、超声破碎、离心后获得卵囊可溶性蛋白（ESSP）。6-7周龄BALB/c小鼠前肢腋窝注射结肠癌细胞（5×10~5）,建立结肠癌（CT26）皮下肿瘤模型,应用不同剂量ESSP腹腔注射荷瘤小鼠,根据肿瘤生长曲线、相对肿瘤增值率、小鼠生存率和外周血淋巴细胞增殖能力,筛选ESSP抗结肠癌有效浓度;应用流式细胞术（FCM）、免疫荧光组织化学等实验方法检测ESSP对皮下肿瘤生长的影响以及荷瘤小鼠免疫指标的变化情况;静脉注射结肠癌细胞（1×10~5）建立结肠癌转移模型,研究ESSP对结肠癌转移的影响。【结果】结果表明:（1）ESSP抗结肠癌有效浓度为50μg/d,连续注射5d,ESSP能够显著抑制小鼠结肠癌皮下肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠生存时间,淋巴细胞增殖能力显著增强。（2）脾脏树突状细胞表面主要组织相容性复合体MHCⅠ、MHCⅡ和共刺激分子CD80、CD86的表达显著升高,并提高了其分泌IL-12的水平,活化了树突状细胞。（3）ESSP增强NK细胞杀伤作用,小鼠脾脏中NK细胞数量增加,其表面的杀伤相关分子CD107表达升高,脾和腋下淋巴结NK细胞分泌的IFN-γ水平明显升高,提示NK细胞的功能增强。（4）ESSP激活淋巴细胞,小鼠脾脏、腋下淋巴结和肠系膜淋巴结中CD8+T细胞分泌的IFN-γ水平升高,脾脏和腋下淋巴结中CD8+T细胞表面CD107表达增加,说明ESSP能够激活CD8+T细胞,诱导CTL作用;ESSP体内致敏的淋巴细胞能够显著抑制CT26结肠癌细胞增殖;小鼠外周血淋巴细胞CD4+/CD8+比值升高,提示小鼠免疫处于免疫增强状态。（5）ESSP组肿瘤组织中血管内皮细胞表面标志CD31表达明显降低,说明ESSP能够抑制肿瘤组织血管生成。（6）建立CT26肿瘤细胞肺转移模型,研究ESSP对肿瘤转移的影响,结果显示小鼠肺脏肿瘤转移结节数量显著降低,小鼠生存率明显提高。结果提示,ESSP能够抑制皮下肿瘤生长和结肠癌转移,通过刺激DC活化了T细胞和NK细胞,增强了抗肿瘤细胞免疫应答,肿瘤浸润淋巴结中CD8+T细胞、NK细胞杀伤功能增强,提高荷瘤小鼠生存时间。【结论】斯氏艾美尔球虫可溶性蛋白通过诱导树突状细胞活化增强抗原递呈功能提高CD8+T细胞、NK细胞杀伤肿瘤细胞功能而有效抑制小鼠结肠癌肿瘤形成和转移。
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