HEIH与HULC在肝癌细胞增殖及侵袭中的分子机制研究

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目的:研究长链非编码RNA(long noncoding RNAs,lncRNA)HEIH与HULC在肝癌细胞中的表达情况及在肝癌细胞增殖侵袭中的分子作用机制。方法:选择肝癌细胞系MHCC97L、HepG2以及人正常肝细胞HL-7702为研究对象,通过Real-time PCR方法检测HEIH与HULC的表达水平。设计合成HEIH和HULC特异性siRNA及HEIH和HULC RNA的表达质粒,抑制或过表达HEIH和HULC的表达水平,通过细胞凋亡实验,Transwell小室细胞侵袭等实验,研究HEIH或HULC在肝癌细胞增殖及侵袭中的作用。通过免疫印迹杂交,检测HEIH与HULC对肿瘤细胞侵袭相关基因表达的作用,进而探讨HEIH与HULC在肝癌细胞增殖侵袭中的分子作用机制。结果:相比于对照组,肝癌细胞中两种lnc-RNA的表达量均显著上调(P<005),其中HepG2细胞中HULC的表达量高于MHCC97L。MTT细胞增殖实验结果表明,过表达lnc-RNA HULC后,MHCC97L、HepG2细胞的增殖速率明显增高,而lnc-RNA HEIH的过表达对于细胞增殖速率影响(相对于空载质粒)不显著(P>0.05)。Transwell细胞侵袭实验结果表明,lnc-RNA HEIH、lnc-RNA HULC的过表达均可以显著增强MHCC97L、HepG2的侵袭能力,然而,通过siRNA抑制lncRNA的表达后,MHCC97L、HepG2的侵袭能力的变化不显著(P>0.05)。过表达HULC后,HepG2细胞中Snail的表达量也出现上调。结论:相对于正常对照细胞,HEIH与HULC在肝癌细胞中均明显高表达。HULC可以显著促进肝癌细胞增值,HEIH与HULC与肝癌细胞的侵袭能力成正相关。
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