论文部分内容阅读
研究背景:醛糖还原酶（AKR1B1）催化底物广泛,生理功能多样,可通过调节生长因子、细胞因子、氧化应激等介导的细胞内信号传导途径,参与多种肿瘤的发生发展过程,如乳腺癌、肝癌、结肠癌等。有研究发现肝细胞癌（HCC）组织中AKR1B1高表达,但AKR1B1在HCC组织中的细胞定位以及与临床特征相关性目前尚无报道。肝细胞癌中AKR1B1表达调控的相关研究甚少。研究目的 :基于前期研究成果,本研究拟检测不同HCC组织及细胞系中AKR1B1表达差异,并分析其与临床特征的关系;初步探究氧化应激导致HCC中AKR1B1表达上调的分子机制。方法 :利用本实验室制备的抗AKR1B1单克隆抗体,通过WB（蛋白质免疫印迹）及IHC（免疫组织化学）定量和定位分析HCC组织及细胞系中AKR1B1表达模式;通过双荧光素酶报告基因实验、ChIP实验探究H2O2诱发的氧化应激导致肝癌细胞中AKR1B1表达上调的分子机制。结果 :通过IHC检测了48例肝癌组织,其中23例（约48%）AKR1B1呈阳性,且癌组织中AKR1B1主要表达于肝细胞。癌旁组织也检测到AKR1B1阳性细胞,但仅表达于间质细胞,实质肝细胞不表达。进一步分析显示,癌组织中AKR1B1表达量与HBV感染程度呈显著正相关。通过WB检测了10株肝癌细胞,均有不同程度的AKR1B1表达,其中5株细胞高表达AKR1B1,且转移性肝癌细胞系中AKR1B1表达高于非转移性细胞系。划痕实验显示抑制AKR1B1可抑制肝癌细胞体外迁移。H2O2诱发的氧化应激可引起肝癌细胞中AKR1B1表达的永久性上调,进一步拟通过双荧光素酶报告基因实验、ChIP实验研究相关分子机制。结论:上述结果表明:肝癌细胞中AKR1B1表达高于癌旁细胞,AKR1B1表达与HBV感染程度呈显著正相关。HBV感染引起的氧化应激可能是导致肝癌细胞中AKR1B1上调表达的原因之一,进一步机制有待探究。肝癌细胞中异常表达的AKR1B1与细胞迁移能力有关。