【摘 要】
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本研究发展了一种免标记免固定的海水致病菌检测方法,检测原理如下:核酸适体由于富含磷酸根基团而带有大量负电荷,能够与聚阳离子鱼精蛋白发生较强的静电作用;通过电流调控内充
【机 构】
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中国科学院烟台海岸带研究所,烟台,264003
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本研究发展了一种免标记免固定的海水致病菌检测方法,检测原理如下:核酸适体由于富含磷酸根基团而带有大量负电荷,能够与聚阳离子鱼精蛋白发生较强的静电作用;通过电流调控内充液中的鱼精蛋白在聚阳离子敏感膜表面释放,核酸适体能够与其发生作用,引起电极电位变化;细菌与核酸适体作用能够改变核酸适体的构型或表面电荷,从而影响其与鱼精蛋白的作用,电极电位变化发生改变,据此实现致病菌的灵敏检测。将该方法应用于流动注射分析中,能够实现大批量样品的快速检测。
本研究以鼠伤寒沙门氏菌为例,构建了检测海水致病菌的流动注射分析系统:以核酸适体为分了识别元件,以聚离子敏感膜电极为检测器,以恒电流调控聚离子在敏感膜表面释放,实现海水致病菌的检测。研究表明,当流速为1.2 mL/min、外加电流为10 nA、进样量为80μL、核酸适体用量为0.08 nmol时,电极能够对800-800000 cfu/mL的鼠伤寒沙门氏菌进行电位检测。
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