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PTTV1和PTTV2基因组结构相似,有3个大的开放阅读框(Open reading frames,ORFs)(ORF1、ORF2和ORF3),其中ORF1被认为是编码病毒壳体蛋白(Cap)的基因,ORF2编码可能病毒复制酶相关蛋白(Rep),ORF3编码蛋白与细胞凋亡有关.由于Cap蛋白为病毒主要结构组成蛋白,能够刺激机体产生体液和细胞免疫反应,是建立检测诊断方法的理想靶抗原.为了开展该病毒血清学诊断方法的建立,本研究对PTTV2的ORF1基因进行扩增,并克隆到pBlueBac4.5N5-His TOPO TA载体,分别构建了PTTV2-ORF1全长序列(pBlueBac4.5N5-His-PTTV2-ORF 1-F)和截短的N端ORF1部分序列(pBlueBac4.5N5-His-PTTV2-ORF 1-S)的重组质粒.将上述2种重组质粒与Bac-N-BlueTM DNA共转染昆虫细胞(Sf21),经3次病毒蚀斑克隆,获得了2株重组杆状病毒,分别表达全长和截短的TTV2 Cap(rBlueBac-PTTV2-ORF1-F和rBlueBac-PTTV2-ORF1-S).重组杆状病毒毒种接种昆虫细胞进行重组蛋白表达,优化表达条件,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表明,表达的全长和截短重组蛋白分子质量分别为79kDa和43 kDa.在重组蛋白C末端设计了6 xHis-Tag标签,采用Ni2+亲和层析法进行了蛋白纯化.为该病毒血清抗体检测和疫苗免疫的研究奠定了基础.