RT-PCR检测兔出血症病毒方法的建立及应用

来源 :第四届(2014)中国兔业发展大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:li359990774
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【目的】建立能快速、特异、敏感的检测并临床应用的兔出血热病毒RT-PCR方法。【方法】根据GenBaank公布的RHDV序列,设计了3条引物,对引物组合进行了筛选,优化PCR体系各反应条件,测定该方法的敏感性与特异性,并进行临床应用对比实验。【结果】筛选出的引物组合能够特异性扩增331bp产物,Mg2+离子浓度在1.01.5mmol/L扩增效果最好,退火温度在5060℃之间扩增无差异性;该方法可以扩增102拷贝以上的模板,对兔轮状病毒与水泡性口炎病毒检测结果均为阴性;临床应用对比实验显示,该方法自27份临床采集样本较HA方法多检出3例RHDV阳性样本,检出阳性率由66.7%提升至77.8%。【结论】本研究建立的RT-PCR诊断方法具有特异、灵敏、快速等特点,能够用于该病的临床检测,为防控该病提供了技术保障。
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