通过基因组定量研究猪瘟病毒在细胞中的增殖特性

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiong100
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应用间接免疫荧光、Real-timePCR和病毒感染滴度(TCID50)测定技术,分别从病毒基因表达产物、病毒基因组RNA复制水平和病毒感染滴度变化三个方面,研究了猪瘟病毒在PK-15细胞中增殖的特点,间接免疫荧光检测结果显示:感染后8h能检测到被荧光抗体染色的感染细胞,随感染时间的延长,出现荧光的细胞数量逐渐增多,在感染后72h,所有细胞均能出现荧光.Real-timePCR结果显示:病毒感染细胞后其基因组RNA的分子数在8-24h快速增加,表明在病毒感染细胞的初期,病毒的基因组RNA复制呈加速趋势,基因组RNA的数量在感染后72h达到高峰;另外,在感染后8h能检测到负链RNA,负链RNA在病毒增殖过程中维持在较低的水平.而病毒的感染滴度增加趋势与基因组类似,在病毒感染8h后能检测到具有感染性的子代病毒,病毒的感染滴度在8-20h之间高速增长,24-48h之间增长速度减慢,TCID50在感染后48-54h达到高峰,能在72h之内维持较高的感染滴度.
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