基于rpoB基因的分枝杆菌菌种鉴定的数据库的建立和软件开发

来源 :中华医学会结核病学分会2012年学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hualing_xue
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景 目前有四种基因序列常用于分枝杆菌菌种鉴定,分别为16S rDNA、16s-23s rRNA间区(ITS)、hsp65和rpoB基因.四种基因序列中唯有rpoB基因数据信息不够完整,尚未建立专门的序列分析数据库.目的 建立针对rpoB基因的数据库,提高rpoB基因用于分枝杆菌菌种鉴定的方便性和准确性.方法 利用来自北京胸科医院保存的66种分枝杆菌标准株和300株已知菌种名称的临床分离分枝杆菌,双向测序获得rpoB基因序列;此外通过GeneBank检索另外90种分枝杆菌数据补齐全部156种分枝杆菌的rpoB基因序列数据库;利用一株诺卡氏菌作为根,绘制分枝杆菌属rpoB基因的系统进化树,计算细菌之间的相似度,并编写基于rpoB基因的分枝杆菌菌种鉴定软件.结果 绘制了目前已发表了ropB基因的全部156种分枝杆菌的系统进化树;构建了包括rpoB基因分枝杆菌种间数据和种内数据的数据库;通过计算其相似度,开发基于rpoB基因的分枝杆菌菌种鉴定程序软件.结论 基于rpoB基因的分枝杆菌菌种鉴定程序软件包括了不同菌种分枝杆菌的所有已知rpoB基因序列数据,同时兼顾了多种分枝杆菌的种内变异,是一款比较全面的rpoB基因序列分析数据库,但是实用性仍有待多中心临床验证.
其他文献
目的 集合PCR技术、微孔板杂交和酶联免疫显色三种检测技术于一体,建立一种针对耐多药(MDR)结核分枝杆菌进行耐药快速检测的新型实验室检测技术.方法 收集2009年至2010年武汉市医疗救治中心的结核分枝杆菌临床分离株,并进行四种一线抗结核药物(RFP、INH、EMB、SM)的药敏实验.随机选取的40例临床株中包括8例全敏感株和32例不同耐药模式的耐多药临床分离株,耐多药菌株中有29例至少对乙胺丁
目的 对我国首株临床分离获得的非结核分枝杆菌M.chimaera进行生化鉴定、药物敏感性和毒力检测,为临床诊断和治疗提供科学依据.方法 通过传统培养的鉴定方法并结合生化试验对一株临床分离株进行表型特点的研究.高效液相色谱分析其细胞壁中分枝菌酸的组成.设计特异引物对该菌株基因组DNA进行16S,ITS,hsp65及rpoB基因的扩增、序列测定和和同源性比对分析.最低抑菌浓度法测定该菌株对临床常用的2
目前常用的传统的涂片抗酸染色、结核菌培养以及胸片检查虽然对大部分结核病能作出正确的诊断,但对某些病人亦可造成误诊或漏诊;结核菌培养虽特异性较高,但因时间较长,不能满足临床快速诊断的需要;近几年也出现了几种快速诊断方法,但存在较大的缺陷,如短期培养后抗原免疫原性分析虽能鉴别典型和非典型分枝杆菌,敏感性较高,但存在培养时间长,重复性尚差的缺点;另一种是短期培养后核酸探针杂交法能有效地防止培养的假阴性结
会议
目的 应用免疫蛋白组学从结核分枝杆菌H37Rv基因组中的RD区筛选出两个新的结核特异性抗原,通过肽指纹质谱及其生物信息学的方法鉴定为结核分枝杆菌ESXO和Rv3117,构建重组蛋白ESXO和Rv3117,并对其免疫原性进行评估.方法 采用常规分子克隆方法获得结核分枝杆菌ESXO和Rv3117的基因片段.将酶切处理后的基因片段分别定向克隆到原核表达载体pET-32a,酶切分析和序列测定为ESXO和R
目的 比较目前最为常用的用于分枝杆菌菌种鉴定的4个同源基因16s rRNA编码基因、16s-23srRNA间区(ITS)、hsp65和rpoB基因对于鉴定不同种分枝杆菌的价值.方法 选取54种分枝杆菌标准株和来自北京胸科医院临床分离的非结核分枝杆菌300株.所有菌株提取DNA后,平行进行16s rRNA编码基因、ITS、hsp65和rpoB基因的PCR扩增,之后进行基因序列测定,并将序列结果输入美
会议
背景 非结核分枝杆菌感染与结核分枝杆菌感染在临床表现上难于区分,因此对非结核分枝杆菌进行准确的鉴别诊断对于疾病的治疗和控制十分重要.副瘰疬分枝杆菌在2004年由加拿大首次分离报道,为暗产色、慢生长分枝杆菌,表型特征与瘰疬分枝杆菌相似,基因特征与猿猴分枝杆菌相似.目前全球仅有8例报道,而对于副瘰疬分枝杆菌的致病性和药物敏感性还了解的较少.目的 研究我国首例从呼吸疾病患者痰标本分离到的副瘰疬分枝杆菌的
会议
目的 明确结核感染T细胞检测对结核病诊断的意义.方法 筛选2012年1月至2012年6月间124名经分枝杆菌菌种鉴定证实感染结核分枝杆菌的住院患者,进行结核感染T细胞检查结果进行系统分析,总结其对于肺结核临床诊断的意义.结论 结核感染T细胞检测对肺结核临床早前诊断可以提供科学依据,其数值变化可以反映病变活动情况.
目的 探讨ESAT-6刺激下体外培养的DC、NKT产生的细胞因子浓度变化.方法在10μg/mlESAT-6刺激下,采用ELISA检测体外培养的NKT和DC+NKT细胞产生的细胞因子IL-2、IL-10、IFN-γ和TNF-α的浓度变化情况,流式细胞术检测CD3+ CD16+56+细胞变化情况.结果在10μg/ml ESAT-6刺激后,NKT组CD3+ CD16+56+细胞分别为11.80±1.19
目的 分析中国13省市地区26株结核分枝杆菌利福平耐药株rpoB基因突变特点.方法 从全国耐药基线调查菌株库中挑选利福平耐药菌18株,敏感株8株,采用Alamar -Blue法测定其MIC.应用PCR扩增结核分枝杆菌的rpoB基因688bp序列,并进行测序分析菌株的突变情况.结果 8株RFP敏感株无rpoB突变.在18株利福平耐药株中,有15株(83.3%)检测到rpoB突变,其中包括531位点突
目的 探讨评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在结核性脑膜炎中的辅助诊断价值.方法 对结核性脑膜炎组24例和对照组10例患者,应用ELISPOT试验检测结核菌特异性早期分泌靶抗原6 kD(ESAT-6)和10 kD培养滤过蛋白(CFP-10)刺激后外周血中释放γ-干扰素的特异性T细胞.同时对脑脊液标本进行涂片、培养、PCR检测.结果 结核性脑膜炎患者中外周血单个核细胞ELISPOT检测敏感性为9