【摘 要】
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本研究将猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、2型猪圆环病毒(PCV-2)5种病毒核酸的特异cDNA片段作为探针点制于氨基修饰的玻片上，以5种细胞培养毒的核酸作为模板，进行不对称PCR扩增，制备靶物，经绿色荧光染料Cy3标记后，分别与cDNA微阵列的芯片探针进行杂交。杂交信号经Genepix4000A扫描仪扫描。结果显示，芯片探针
【机 构】
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黑龙江省八一农垦大学,黑龙江,大庆,1631109 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国
【出 处】
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第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会
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本研究将猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、2型猪圆环病毒(PCV-2)5种病毒核酸的特异cDNA片段作为探针点制于氨基修饰的玻片上，以5种细胞培养毒的核酸作为模板，进行不对称PCR扩增，制备靶物，经绿色荧光染料Cy3标记后，分别与cDNA微阵列的芯片探针进行杂交。杂交信号经Genepix4000A扫描仪扫描。结果显示，芯片探针可以分别特异地与Cy3标记的5种特异靶物结合。应用本研究制备的基因芯片对100份现地采集的猪全血样品进行检测，其中，PRRSV阳性样品26份，PCV-2阳性样品47份，且PRRSV、PCV-2混合感染阳性样品17份，PPV阳性样品5份，PRV阳性样品2份，CS-FV检测阳性样品20份。结果表明，本研究设计并点制的cDNA芯片可以特异的检出5种病毒，具有明确的、潜在的诊断应用性。
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为了解北京地区急性散发性戊型肝炎患者感染的戊型肝炎病毒(HEV)基因型和亚型分布，本文采用实时荧光PCR的方法检测93例急性散发性戊型肝炎患者粪便标本，并对阳性粪便标本应用RT-PCR方法扩增HEV RNA开放读码框架2(ORF2)部分序列，进行克隆测序，利用生物信息学软件进行基因型和亚型分析。结果显示，93例急性戊型肝炎患者粪便标本经实时荧光PCR方法检测52份阳性(55.91％)。RT-PCR
目的：克隆表达乙型肝炎病毒DNA聚合酶(HBV-Pol)片段，建立乙型肝炎病人血清乙型肝炎病毒聚合酶抗体(抗-HBp)的间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA)方法。方法：采用限制性内切酶从含有HBV全长基因组的质粒上切下含HBV-Pol的编码序列，插入原核表达载体pQE30，表达并纯化目的蛋白，以其包被酶联板，用间接ELISA方法检测乙型肝炎病人血清中抗-HBp抗体。结果：成功将HBV-ol插入原
目的：研究细胞培养表达HAV病毒结构蛋白的亲和层析纯化工艺。方法：利用两种甲型肝炎病毒结构蛋白的单克隆抗体1HAV-1和2HAV-1偶联亲和层析柱，比较了不同抗体以及偶联密度对纯化活性收率的影响。筛选出适合HAV结构蛋白纯化的单克隆抗体。建立了适合的甲型肝炎病毒结构蛋白纯化工艺。结果：HAV病毒颗粒结构蛋白经过单抗柱一步纯化，其活性回收率可达70％以上。SDS-PAGE证实所纯化的蛋白含有HAV三
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HCV整个基因组呈高度变异，其中位于HCV包膜蛋白E2 N端的27个氨基酸变异最大，故命名为第一高变区(HVR1)。HVR1含有中和性抗原表位，许多学者认为，丙型肝炎病毒通过HVR1抗原的变异形成新的准种，新准种逃避宿主的免疫监测，造成患者的持续感染。本文通过对大量HVR1序列的筛选，获得具有准种代表意义的HVR1抗原，制备HCV变异的多靶点检测芯片，并通过对患者体内变异HVR1抗体的检测，初步建
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