【摘 要】
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目的：放射治疗是恶性胶质瘤的重要有效治疗手段之一,但多数胶质瘤因放射抵抗导致对放射治疗敏感性较低,本实验比较了胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞放疗敏感性的差别,探讨胶质瘤干细胞是否更具放射抵抗性,更进一步探讨了细胞周期检测点蛋白与胶质瘤放射抵抗性的关系.方法：胶质瘤干细胞的分离培养和鉴定；通过克隆形成实验、彗星实验、流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率对比研究胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞的放射敏感性；Weste
【机 构】
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重庆市肿瘤研究所,重庆市,400030 第三军医大学附属新桥医院全军肿瘤研究所,重庆市,40003
【出 处】
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第九届泛珠江区域放射肿瘤学学术大会暨肿瘤放射治疗多中心协作研讨会、重庆市医学会放射肿瘤治疗学专业委员会2014年会
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目的：放射治疗是恶性胶质瘤的重要有效治疗手段之一,但多数胶质瘤因放射抵抗导致对放射治疗敏感性较低,本实验比较了胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞放疗敏感性的差别,探讨胶质瘤干细胞是否更具放射抵抗性,更进一步探讨了细胞周期检测点蛋白与胶质瘤放射抵抗性的关系.方法：胶质瘤干细胞的分离培养和鉴定；通过克隆形成实验、彗星实验、流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率对比研究胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞的放射敏感性；Western blotting检测ATM及其下游蛋白p53、Chk2及其磷酸化蛋白在胶质瘤干细胞及胶质瘤细胞的表达,ATM特异性抑制剂KU55933阻断ATM蛋白功能,并检测阻断ATM对其下游蛋白p53、Chk2的作用.结果：1.分离培养的胶质瘤干细胞表达CD133的阳性比例达80％以上；胶质瘤干细胞具有自我更新、多向分化、更强的成瘤能力.2.克隆形成实验证明胶质瘤干细胞的各项放射敏感性指标均高于胶质瘤细胞(p＜0.05).彗星实验证明射线照射后二者比较有明显的差异(p＜0.05).射线照射后两种细胞的G2期所占比例较照射前明显增加,而且胶质瘤细胞较胶质瘤干细胞G2期所占比例明显增加(p＜0.05).照射前两种细胞凋亡率无明显差异,2GyX射线照射后胶质瘤细胞较胶质瘤干细胞凋亡率明显增加(p＜0.05).3.研究发现电离辐射后磷酸化ATM, p53和Chk2有明显表达(p＜0.05),同时胶质瘤干细胞的三种蛋白的磷酸化水平明显高于胶质瘤细胞(p＜0.05).KU55933作为特异性ATM抑制剂对磷酸化ATM有抑制作用,也对其下游底物磷酸化p53和Chk2产生抑制作用.结论：本实验证明了GSCs较GCs更具放射抵抗性；ATM特异性抑制剂可以提高GSCs的放疗敏感性.
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