蛋白质的糖基化是最重要和最普遍的蛋白质翻译后修饰之一,在生物体内起着极为重要的作用。1糖链组成,结构和含量的改变与许多疾病密切相关,糖组学研究正在成为一个新的研究热点。生物质谱技术的出现,使得糖组学分析的规模和灵敏度都显著提升,但糖组学研究仍处于起步阶段,糖链的质谱分析也存在诸多挑战。相比于肽段和蛋白质,糖链在质谱中的离子化效率相对较低,糖链的相对定量方法也不如蛋白质的定量方法成熟,糖链的高灵敏质谱定性和高可靠质谱定量的新方法亟待发展。2我们发展了一系列基于稳定同位素标记的N-糖组质谱定量新方法,提供了更方便易得的标记试剂和方法,提高了N-糖组定量的通量以及实现了酸性糖链和中性糖链同时定量。为了解决糖链定量中缺乏易得标记试剂和简便标记方法的问题,我们发展了糖链还原端稳定氨基酸标记质谱定量的方法,以商业化易得的同位素精氨酸为质量标签,通过还原胺化反应标记在N-糖链的还原端,建立了N-糖组相对定量的新方法。3近一步地,我们在非还原端的酸性糖链中引入甲胺化同位素标记,还原端和非还原端的双端同位素标记一方面提高了酸性糖链的稳定性和离子化效率,另一方面基于稳定同位素提供的分子量差异实现了唾液酸个数的确认。4此外,我们还发展了基于金属离子标记的伪同位素定量方法,利用还原胺化反应在N-糖链的还原端引入大环化合物DOTA,再利用DOTA与稀土金属离子Lu³⁺/Ho³⁺/Tm³⁺/Tb³⁺之间强的螯合作用,在一级质谱中同时实现4组样品的N-糖组相对定量。5以上方法,同位素标记完全,定在两个数量级线性范围内具有良好的定量准确性和重现性（R2>0.99, CV<20%）。所发展的方法成功用于分析大肠癌病人血清N-糖链的变化,发现在肠癌病人血清样品中N-糖链分支变多且核心岩藻糖化、唾液酸化水平增加。