传染性支气管炎(IB)是危害家禽业的重要疾病.为了构建一个新的N基因片段的串联蛋白作为包被抗原，使抗原位点能更加充分的暴露和去除了非抗原序列，本研究结合IBV N蛋白抗原表位研究进展及线性B细胞表位软件预测结果，综合考虑选出4个位于N蛋白的抗原性基因片段进行串联(命名NE基因)，并在大肠杆菌中表达获得融合蛋白(NE-GST),大小52KDa。以NE-GST融合蛋白为包被抗原，建立ELISA方法检测IBV抗体，结果表明NE-ELISA具有较高的敏感性和特异性。近年来，将多个抗原性片段串联，即多表位抗原，已经应用于抗体检测、疫苗研究等领域。本研究中4个基因片段之间以柔性氨基酸(GPGP或GAGA)连接，可以保证各表位之间独立，且多个抗原表位的联合有利于提高检测方法的敏感性。由于选择的蛋白片段包含多个线性表位，在大肠杆菌中表达其活性不受影响。综上，本研究中基于多个抗原性片段串联的NE-ELISA方法可以用于鸡群IBV特异性血清抗体的检测。