转EBF合成酶基因小麦的PCR检测

来源 :中国植物保护学会2014年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ssddhwl
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  E-β-法呢烯(E-β -farnesene,EBF)是大多数蚜虫的报警信息素的主要或唯—组分,在一些植物中也存在.已报道EBF不但驱避蚜虫,还能够吸引天敌,因此,具有适于“推—拉”策略的良好开发应用潜力.目前,围绕EBF研发蚜虫绿色防控技术主要包括如下3个方面:EBF的植物精油缓释技术、人T合成稳定类似物和转基因植物白动释放.随着转基因作物研究的全面展开,迫切需要建立转外源基因及其表达产物的检测技术以及转基因对目标害虫的效果评价技术规范.本实验以中国农业科学院作物科学研究所提供的12个转EBF合成酶基因小麦品系(实验中按1-12依次编号)为材料,采用一对特异引物(EBF-F:5-GCTGAACGACTC-CCAGAA-3,EBF-R:5-CTCATTAAATGCCCTTGC-3)进行了PCR检测.在经普通PCR检测获得10个阳性转基因小麦品系(1-7、10-12)基础上,利用实时荧光定量PCR检测10个阳性品系不同生育期(分蘖期、起身期、拔节期、灌浆期)叶片的EBF合成酶基因表达谱.结果显示,EBF合成酶在10个阳性品系叶片的不同生育期均有表达.1、7、10、1 1四个转基因小麦品系不同生育期叶片EBF合成酶表达量稳定;2-6及12号品系转基因小麦品系不同生育期叶片表达量不稳定,差异显著,其中,3号品系表达量较高.各品系在拔节期均有较高的表达量.本试验为转EBF合成酶基因小麦的目标基因检测提供了分子检测方法,为进一步开展转基因小麦EBF的释放量及其对麦蚜和天敌行为调控效果奠定基础.
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