花鲈胚胎干细胞培养及体外分化的研究

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胚胎干细胞ES细胞是研究细胞发育与分化的分子机理、建立基因打靶技术和制作定点突变转基因knock-in或缺基因knock-out动物的重要物质基础。为建立海水养殖鱼类胚胎干细胞系和基因打靶技术,以海水名贵养殖鱼类花鲈为材料,进行了胚胎干细胞分离、培养与体外分化的研究。从10多个花鲈囊胚细胞原代培养物中,成功地建立了1个胚胎干细胞系Lateolabrax Japonicus EmbryonicStem Cell LJES1的。该细胞能在体外稳定生长和增殖,目前已培养至100多代。形态观察表明LJES1细胞呈小的圆形、多角形或多边形,具有较大的细胞核;组织化学染色表明LJES1细胞具有强的碱性磷酸酶活性;染色体分析表明LJES1细胞具有正常的二倍体核型。研究了不同因子对鲈鱼胚胎干细胞生长和增殖的影响。在适当条件下,LJES1细胞可分化形成黑色素细胞、神经细胞、肌肉细胞及拟胚体等不同类型细胞,显示其具有发育多能性。
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