【摘 要】
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目的:模拟体内微环境,探讨兔坐骨神经匀浆上清液对脂肪干细胞的诱导分化作用. 方法:用钳夹法建立兔坐骨神经损伤模型,并采用组织匀浆器制作神经匀浆,高速离心取其上清液.
【机 构】
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天津医科大学总医院骨科生物力学实验室,天津市和平区鞍山道154号,300052
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目的:模拟体内微环境,探讨兔坐骨神经匀浆上清液对脂肪干细胞的诱导分化作用.
方法:用钳夹法建立兔坐骨神经损伤模型,并采用组织匀浆器制作神经匀浆,高速离心取其上清液.从兔颈背部脂肪中分离培养脂肪干细胞并传至P3代,诱导前24h加10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)入培养液中以促分裂,再以正常坐骨神经、损伤3d、损伤7天及损伤14d坐骨神经匀浆上清液作为诱导剂进行诱导.诱导后观察细胞的形态变化;MTT法测定不同诱导剂诱导后细胞活性;免疫细胞化学染色检测细胞中S-100、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况;RT-PCR检测诱导前后细胞的GFAP及S-100的变化.
结果:加入神经匀浆诱导后24h，部分细胞的形态已发生改变，4d后大部分细胞不仅在形态上表现为许旺样特征，而且5-100及GFAP等特异性抗体呈阳性表达，RT PCR结果也显示诱导组GFAP, S-100的表达增高，且损伤7d组阳性率最高。
结论:损伤坐骨神经匀浆上清液能够将脂肪干细胞诱导为类许旺细胞。
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