鸡传染性支气管炎病毒793/B TA03株S1基因的克隆与原核表达

来源 :中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mokung1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)793/B S1基因序列,设计和合成两对引物,以TA03株IBV病毒RNA为模板,通过RT-PCR扩增出S1蛋白基因的两个部分重叠片段,分别将其插入表达性载体pGEX-6P-1中,酶切鉴定和序列测定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western-blotting试验.结果表明表达的融合蛋白产物大小均与预期的60kDa大体相符,而且表达的蛋白质具有免疫学活性.
其他文献
本试验通过流式细胞术(Flowcytometry,FCM)分析了HVT、CVI988疫苗免疫鸡外周血淋巴细胞(PBLC)表面MDV相关抗原的动态分布,发现1日龄一次免疫鸡在免疫后6天左右MDV抗原阳性的淋巴细胞数达到高峰(分别为11.42﹪和14.92﹪),随后很快下降并维持很低的水平;7日龄一次免疫鸡在免疫后7天左右MDV抗原阳性淋巴细胞数也达到高峰(分别为13.62﹪和11.6﹪),随后也很快
将临床健康、体重30±1 Kg杜长大育肥猪150头随机分成三大组,,第Ⅰ组和第Ⅱ组为实验组,在基础日粮中分别添加0.8%、0.5%的复方绞股蓝粉剂;第Ⅲ组为对照组,只喂给基础日粮.常规方法饲养管理,喂至95~100 Kg时,耳静脉采血,分离血清,测定血清中9项生化指标.结果:试验Ⅰ组血清球蛋白(G)较对照组有明显的增加(p<0.05),甘油三脂(TG)明显降低(p<0.05),总胆固醇减少,其它生
用试管肉汤两倍稀释法测得头孢拉定及氧氟沙星对鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为4.0和0.1 μg/mL.按80,160和320 mg/L的头孢拉定及10 mg/kg的氧氟沙星分别给实验性鸡大肠杆菌病患鸡内服,头孢拉定全天自由饮水,氧氟沙星每日分2次饮水,共3 d.这些药物对鸡大肠杆菌病的治愈率分别为93.3%,96.7%,100%和93.3%,而感染对照组鸡的死亡率为70.0%.头孢拉定组和氧氟沙星
比较了酶联免疫吸附试验(ELISA)和乳胶凝集试验对犬猫进行弓形体(Toxoplasma gondii)抗体检测的结果.在66只犬猫的血清中,ELISA方法检测的阳性率为24.0%,乳胶凝集试验阳性率为21.0%,二者的检测结果差异不显著(p>0.05).后采用ELISA方法对北京地区家养的159只犬和128只猫进行了弓形体IGg抗体的检测,共有21只犬(13.21%)和18只猫(14.06%)检
根据GenBank中瘦蛋白(leptin)的基因序列设计合成了引物和探针,对荧光定量PCR的方法进行了方法学的评估,建立了TaqmanMGB荧光定量RT-PCR检测方法.结果表明:所构建的PMD-18Tleptin基因荧光定量PCR检测标准品应用Taqman荧光探针技术建立的标准曲线线性关系好(R2=0.996),灵敏度和特异性高(可检测出低于10个拷贝数/μL的样品),准确可靠.此方法可作为荧光
为了探明冷应激对雏鸡抗氧化功能的影响,本文以公雏鸡为试验动物,进行急、慢性冷应激处理(12±1 ℃),通过对下丘脑和血清总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的检测,表明冷应激可使机体的抗氧化功能发生改变,诱发氧化胁迫,导致机体内自由基增多,对机体造成损伤.
本试验采用2×4因子完全随机设计,比较了不同硒源和水平对蛋鸡血硒含量及血液总抗氧化能力(T-AOC)的影响.将南京某蛋鸡场68周龄、产蛋率约为85%的健康罗曼蛋鸡700羽按饲养试验要求分为7组,每组5个重复,每重复5笼,每笼4羽.将富硒酵母(Se-enrichedyeast,SY)和亚硒酸钠(sodium selenite,SS))2硒源分别以4个硒水平0.0,0.2,0.5和1.0 mg/kg添
近年来,河南省豫东地区10个县、市(区)的猪场发生了附红细胞体病,经实验室涂片检验、临床观察、病理剖检等方法诊断和分析后,采用土霉素和阿散酸拌料的方法,保护率达90%以上;采用注射复方914A、血虫清或血虫净、土霉素、阿散酸、安乃近与六甲氧拌料相结合的方法,治愈率达92%.如果同时重视治疗猪弓形体病、链球菌和胸膜炎等继发病,可大大降低该病的病死率.
通过成骨细胞(osteoblast,OB)与脾细胞共培养在体外诱导脾细胞转化为破骨细胞(Osteoclasts,OC),转化过程中分别加入5 mmol/L、3 mmol/L的钙(Calcium,Ca)或磷(Phosphorus,P)及不同浓度比例的钙磷,对照不添加钙磷因子.采用形态学观察、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色计数、扫描电镜观察象牙片吸收陷窝,研究钙磷因子作用下OC的生成和活化.结果表
为研究本实验室构建并制备的DNA疫苗-脂质体复合物在鸡体内的组织分布和安全性,经腿部肌肉分点注射及滴鼻、点眼两种免疫途径接种7日龄的非免疫健康雏鸡,利用PCR方法对疫苗在鸡体内的分布及整合进行检测研究.并通过肌肉注射和滴鼻、点眼两种途径免疫接种1日龄雏鸡;相同剂量连续免疫接种7日龄雏鸡以及5倍常规使用剂量(超大剂量)免疫接种相同日龄雏鸡,来进行免疫毒性实验研究.实验期间对实验鸡进行一般临床表现观察