【摘 要】
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目的 通过体外观察甲基泼尼松龙对人肾小球系膜细胞细胞增殖的抑制作用,及对某些周期蛋白和CDK激酶等蛋白表达的影响,探讨其对人肾小球系膜细胞细胞增殖的抑制作用及其机
【出 处】
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中国工程院医药卫生学部肾脏病前沿论坛、第十三届华北地区暨北京市肾脏病学术年会
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目的 通过体外观察甲基泼尼松龙对人肾小球系膜细胞细胞增殖的抑制作用,及对某些周期蛋白和CDK激酶等蛋白表达的影响,探讨其对人肾小球系膜细胞细胞增殖的抑制作用及其机制. 方法 (1)利用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测不同浓度(1mg/L、10mg/L、100mg/L)的甲基泼尼松龙处理后的人系膜细胞的增殖情况.(2)用流式细胞仪检测不同浓度的甲基泼尼松龙(1mg/L、10mg/L、100mg/L)分别作用后的人系膜细胞中CyclinE、CyclinD1、P27Kip1、CDK2、CDK4表达的改变.(3)利用Western blot法检测不同浓度的甲基泼尼松龙(1mg/L、10mg/L、100mg/L)分别作用后的人系膜细胞中CyclinE、CyclinD1、P27Kip1表达的变化. 结果 (1)与对照组相比,甲基泼尼松龙作用于人系膜细胞24小时后,浓度为1mg/L、10mg/L、100mg/L的甲基泼尼松龙能抑制系膜细胞的增殖,且随着甲基泼尼松龙浓度的增大,抑制作用更显著,呈一定的剂量效应关系.(2)流式细胞仪检测后,与对照组相比,甲基泼尼松龙作用过的人系膜细胞CyclinE、CyclinD1、CDK2、CDK4表达显著下降(p＜0.05),P27Kip1的表达显著上升(p＜0.05),且随着浓度梯度的增高,下降或升高趋势越明显(p＜0.05).(3)Western blot法检测后,与对照组相比,甲基泼尼松龙作用过的人系膜细胞中CyclinE、CyclinD1表达显著下降(p＜0.05),P27Kip1的表达显著上升(p＜0.05),且随着浓度梯度的增高,下降或升高趋势越明显(p＜0.05). 结论 甲基泼尼松龙在体外作用于人系膜细胞,可显著抑制细胞的增殖,并可以使细胞内CyclinE、CyclinD1、CDK2、CDK4蛋白的表达显著下降,使细胞内P27Kip1蛋白的表达显著上升,下降和上升作用均与浓度正相关.
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