IP3 Rs在GC-2std细胞中的表达及对其增殖作用机制研究

来源 :中华急诊医学杂志第八届组稿会暨急诊医学首届青年论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xzb3560680
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目的:观察IP3Rs(1,4,5三磷酸肌醇受体)在GC-2std(GC-2)细胞中的表达情况并且探讨IP3Rs在GC-2细胞增殖中的作用。 方法:利用RT-PCR的方法观察IP3Rs在GC-2细胞以及在小鼠大脑,心肌,骨骼肌及睾丸中的分布情况。免疫荧光法观察IP3Rs在细胞中的分布及表达。MTT法观察在不同浓度IP3Rs的拮抗剂(2-APB)作用下,IP3Rs对细胞增殖的影响,利用流式细胞术观察2-APB对细胞周期的影响。 结果:IP3Rs的三种亚型在GC-2细胞中均有表达且在小鼠大脑,心肌,骨骼肌,睾丸等多种组织中广泛分布。免疫荧光实验亦表明IP3Rs分布于胞膜、胞质及核内。相差显微镜下观察,发现2-APB处理组与对照组比较,细胞数量明显减少。MTT实验结果亦表明:随着2-APB浓度的增加(5 uM,25 uM,100 uM,200uM,400 uM),与对照组比较吸光值呈浓度依赖性的减小,经统计学分析:分别为P>0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01且EC50=92.0114。流式细胞结果显示:100 uM 2-APB处理组与对照组比较,细胞处于S期、G2期的数目增多。 结论:IP3Rs在GC-2细胞及小鼠多种组织中表达,与细胞的增殖密切相关,可能与其参与调节细胞周期有关。
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