原硅酸通过BMP-2/Smad/RUNX2信号通路促进成骨细胞分化的机制研究

来源 :中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:marina12345
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  目的 1.探讨原硅酸是否通过上调骨形态发生蛋2 ( BMP-2) 的表达来促进大鼠骨髓间充质干细胞( BMSCs)向成骨细胞分化.2.明确原硅酸是否通过BMP-2/Smad1/5/RUNX2信号通路促进成骨细胞表达一型胶原(COL-1)和骨钙素. 方法 分别向大鼠BMSCs中加入不同浓度(0、5、10、20、50 μM)的原硅酸作用48h后,Western blotting(WB)法检测BMP-2的表达;向大鼠BMSCs中加入浓度为10μM的原硅酸,分别作用不同的时间后,WB法检测BMP-2的表达;使用BMP-2拮抗剂noggin预先处理细胞2 h,WB法检测BMP-2的表达;向大鼠BMSCs中加入不同浓度的原硅酸作用7 d后,以及使用noggin预先处理细胞2 h后,均用微量酶标法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)的活性;向大鼠BMSCs中分别加入不同浓度(0、10 μM)的原硅酸作用21 d后,细胞茜素红钙染色法检测钙结节的生成量;分别向人成骨肉瘤细胞MG-63和U2-OS细胞系中加入不同浓度的原硅酸,作用72h后,WB法检测COL-1、骨钙素及BMP-2/Smad/RUNX2信号通路相关蛋白的表达.
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