目的 准确评价和预测化学物质的遗传毒性至关重要,分子生物标志物是毒性评价与检测的重要方法。前期研究中,我们采用基因芯片技术对给予多种遗传毒性化合物的小鼠肝脏基因表达谱进行分析,其中,特异性诱导最强的是一个功能未知的基因,提示其可能与遗传物质造成的损伤应答有关。本研究拟深入研究该基因成为全新遗传毒性生物标志物的可能性,并初步探讨其功能。方法 基因芯片数据验证：根据NCBI上给出的该基因序列,设计特异性引物,选取基因芯片实验中所用部分化合物通过Real-time PCR方法验证基因芯片实验结果。功能考查：设计两对该基因特异的siRNA,转染NIH/3T3后48hr,以Co-60射线照射,通过流式细胞仪技术、彗星实验、微核实验、克隆形成实验考查该基因被knock down后,细胞对射线造成的细胞周期阻滞、DNA损伤、染色体损伤和细胞存活率的改变与正常细胞相比是否有差异。一般特征考察：Realtime PCR方法考察基因表达的组织分布特征和时间特征。结果 基因芯片数据验证：小鼠给予二乙基亚硝胺4hr/20hr、二丙基亚硝胺4hr/20hr、乙基亚硝基脲4hr和邻氨基偶氮甲苯4hr后,肝脏中该基因的表达均有显著增高；而给予三氯乙烯4hr/20hr、乙醇4hr/20hr后,未见该基因表达有显著变化。上述结果验证了基因芯片的结果,即该基因特异地被遗传毒性物质诱导,而非遗传毒性物质对其表达无影响。功能考查：该基因被knock down后,射线诱发的NIH/3T3细胞微核率上升,彗星拖尾更严重,细胞存活率下降。但是该基因被knock down后,细胞周期G2/M阻滞没有明显改变。一般特征研究发现该基因在小鼠脾脏,胚胎,肾脏,肝脏和心脏中有表达。体外射线照射NIH/3T3细胞考查基因表达的时间特征,发现该基因的表达在照射后4小时达到峰值,8小时开始下降。结论 该基因的表达可以特异性被遗传毒性物质诱导,有可能成为一个新的遗传毒性生物标志物。该基因功能可能与DNA损伤应答或DNA修复相关。