【摘 要】
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小分子热激蛋白( sHSP)是一类多功能的超基因家族蛋白,是细胞或生物体在受热或其他因素刺激后,所产生的一类在生物进化中较为保守并由热激蛋白基因所编码的伴随细胞蛋白,又称热休克蛋白或应激蛋白.sHSP是很重要的分子伴侣,它们参与了许多合成通路并且能够参与调节多种生理过程.本文基于橘小实蝇转录组数据,利用RT-PCR和RACE技术扩增获得橘小实蝇小分子热激蛋白基因一个(Bdhsp23.8).该cD-
【机 构】
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西南大学植物保护学院昆虫学及害虫控制工程重点实验室,重庆 400715
【出 处】
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中国植物保护学会2014年学术年会
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小分子热激蛋白( sHSP)是一类多功能的超基因家族蛋白,是细胞或生物体在受热或其他因素刺激后,所产生的一类在生物进化中较为保守并由热激蛋白基因所编码的伴随细胞蛋白,又称热休克蛋白或应激蛋白.sHSP是很重要的分子伴侣,它们参与了许多合成通路并且能够参与调节多种生理过程.本文基于橘小实蝇转录组数据,利用RT-PCR和RACE技术扩增获得橘小实蝇小分子热激蛋白基因一个(Bdhsp23.8).该cD-NA全长开放阅读框为630bp,编码210个氨基酸的多肽,分子量约为23.8kDa,等电点为7.80.定量分析结果表明,在-5℃和0℃胁迫3h后其表达水平和对照(27.5℃)相比没有显著变化,但是,40℃胁迫3h后,其表达水平显著上调,为对照组的18.4倍.利用RNAi干扰技术,在橘小实蝇体内注射Bdhsp23.8的dsRNA,以dsGFP和H2O2作对照,注射12h和24h后对其进行40℃热胁迫3h,观察其死亡率发现,对照组死亡率均为0.处理组的死亡率分别为36％和23％.RT-qPCR分析结果表明,Bdhsp23.8的沉默效率分别为52％和45％.同时,我们发现该基因在第七天成虫的卵巢中特异性表达,而在其他组织中几乎不表达.同样,利用RNAi干扰技术,以dsGFP和H：0作对照,注射第四天的雌成虫,将其饲养到第七天,解剖其卵巢发现,对照组的卵巢滞育率为15％ - 18％,但是处理组的滞育率能够达到70％.研究结果表明,Bdhsp23.8在橘小实蝇抗热胁迫以及其卵巢发育过程中起着至关重要的作用.
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