烟草抗花叶病基因的克隆及其进化分析

来源 :第四届全国植物生物技术及其产业化大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:L175913
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  以不同烟草花叶病抗的种质为试验材料,通过同源克隆法克隆烟草抗花叶病基因.根据GenBank上登录的抗花叶病基因(CN)的核苷酸序列设计一对特异引物对不同烟草种质的基因组DNA进行PCR扩增,共检测出19条抗病谱带,并回收纯化PCR产物进行测序分析,其核苷酸保守序列与其它抗花叶病基因的保守序列具有较高的同源性,达88%.根据克隆的CN设计的特异引物对一些烟草种质进行抗TMV的研究,分子鉴定结果和田间鉴定结果一致性达66.7%.研究结果为进一步鉴定和抗烟草花叶病种质资源利用奠定了基础.
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本研究首先构建含贾第虫组织蛋白酶B基因短反义序列和长反义序列的微型核酶嵌合型犬贾第虫病毒重组质粒.将微型核酶嵌合型犬贾第虫病毒重组质粒线性化后体外转录为mRNA,然后用微型核酶体外切割组织蛋白酶B基因转录体,采用荧光定量PCR检测体外切割效率.
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车轮虫是海水养殖中常见的危害性原生动物.近年来,在南中国海地区由寄生原生动物引起的养殖鱼类和野生鱼类大批死亡的现象时常发生.然而,我国在南中国海地区几乎没有车轮虫分类学的研究的报道.
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