有机磷酸酸酐酶的芽胞表面展示技术研究

来源 :中国化学会第十九届全国有机分析及生物分析学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangxiding138
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有机磷酸酸酐酶(organophosphorus acid anhydrolase,OPAA)可催化含有P-F、P-CN键的有机磷化合物,是目前发现水解该类底物活性最高的酶.但在复杂条件下,酶的活性较低,储存稳定性较差.枯草芽胞杆菌芽胞表面展示技术能提升外源蛋白的贮存稳定性,保持生物活性,而有关芽胞表面展示OPAA的技术研究还未见报道.本研究构建了OPAA的枯草芽胞展示系统,通过免疫印迹和免疫荧光实验证明OPAA成功展示在芽胞表面;活性检测结果证实,通过重组菌株可获得具有水解有机磷化合物活性的重组芽胞,其水解二异丙基氟磷酸酯(diisopropyl fluorophosphates,DFP)的比活力为10.67U/mg.由此表明,本研究成功构建了有机磷酸酸酐酶-锚定蛋白-枯草芽胞杆菌重组系统,对研发具有实用性的功能芽胞生物检测器起到了积极地推动作用.
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