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目的：通过观察RNA干扰沉默GOLPH3对前列腺癌细胞PC-3增殖力、侵袭力和迁移能力的影响,探讨GOLPH3在前列腺癌发生和转移中的作用.方法：(1)设计并合成7对shRNA引物,用限制性内切酶EcoRI和BamHI将pUEGH载体酶切,将线性化的pUEGH和shRNA进行连接转化,对其产物酶切鉴定；慢病毒表达质粒与包装辅助质粒共转染293T细胞包装成慢病毒载体pUEGH-GOLPH3 shRNA.(2)qPCR和Western blot方法检测慢病毒感染后细胞株中GOLPH3的mRNA和蛋白水平的表达变化,评价RNAi干扰的效果.(3)采用MTT实验方法检测感染GOLPH3 RNAi后PC-3细胞增殖生长情况的变化；使用Transwell实验方法检测GOLPH3 shRNA转导PC-3后细胞侵袭能力和迁移能力的改变.结果：(1)PCR及酶切证实pUEGH-GOLPH3 shRNA慢病毒构建成功.(2)GOLPH3 shRNA慢病毒载体和阴性对照慢病毒载体感染细胞后,qPCR和Western blot方法分析后发现与感染阴性病毒载体组相比,感染GOLPH3 shRNA的PC-3细胞内GOLPH3 mRNA水平和蛋白水平分别下降79.40％和75.35％(P＜0.05),GOLPH3 shRNA对GOLPH3在mRNA水平和蛋白水平的抑制率均很理想.(3)细胞增殖实验结果显示与阴性对照慢病毒载体组相比,GOLPH3 shRNA慢病毒载体组对PC-3细胞增殖没有显著影响(P＞0.05).Invasion和Migration实验结果显示感染GOLPH3 shRNA后的PC-3细胞穿过滤膜的细胞数较阴性对照组明显减少(P＜0.05).GOLPH3基因沉默后PC-3细胞侵袭和迁移能力明显减弱.结论：(1)成功构建GOLPH3基因沉默的前列腺癌细胞稳定株.(2)利用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默GOLPH3基因,可以有效降低前列腺癌细胞PC-3中GOLPH3的表达.(3)GOLPH3基因沉默后,前列腺癌细胞的增殖和生长没有明显改变,但是前列腺癌细胞侵袭和迁移能力明显降低.这说明GOLPH3在前列腺癌转移的过程中发挥重要作用,利用RNAi技术下调GOLPH3的表达有望成为一种有效治疗前列腺癌的新方法.