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目的:获得ALAS在大肠杆菌中的高效重组表达重组蛋白,并纯化至均一,为ALAS结构及功能的研究提供基础。方法:本实验利用RT-PCR 方法,以人肝脏组织总RNA 的反转录cDNA 为模板,参照ALAS cDNA 的编码序列,设计合成正反向两条引物,进行ALAS cDNA 的扩增,并构建pET30a(+)-ALAS 重组质粒。把含有外源片段的pET30a-ALAS 重组质粒转入大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达,经镍柱一步纯化获得高纯度的His6-ALAS 融合蛋白。