【摘 要】
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目的：探讨GnRH(促性腺激素释放激素)激动剂(GnRH-a)与GnRH拮抗剂(GnRH-ant)超促排卵对小鼠卵巢生长分化因子9(GDF9)和骨形成蛋白15(BMP15)表达及卵子发育潜能的影响.方法：1
【机 构】
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广州军区广州总医院辅助生育中心,广东广州510010
【出 处】
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广东省医学会第三次生殖医学学术会议
论文部分内容阅读
目的：探讨GnRH(促性腺激素释放激素)激动剂(GnRH-a)与GnRH拮抗剂(GnRH-ant)超促排卵对小鼠卵巢生长分化因子9(GDF9)和骨形成蛋白15(BMP15)表达及卵子发育潜能的影响.方法：180只清洁级昆明小鼠随机分为四个促排卵方案组：(i)GnRH-a超排卵组：GnRH-a+孕马血清(PMSG )+绒毛膜促性腺激素(hCG)超促排卵；(ii) GnRH-ant超排卵组：GnRH-ant+孕马血清(PMSG)+hCG超促排卵；(iii) PMSG组：孕马血清(PMSG) +hCG超促排卵；(iv)对照组：生理盐水代替GnRH-a或GnRH-ant与PMSG.注射hCG后2小时颈部脱臼法处死小鼠,取卵巢组织采用免疫组织化学和免疫印迹方法检测各组小鼠卵巢中GDF9和BMP15蛋白的表达,采用荧光实时定量PCR检测GDF9和BMP15mRNA的表达,并进行相对定量分析比较.各组小组注射hCG后18小时,输卵管中取原核期胚胎体外培养,观察比较2细胞胚胎形成率、囊胚形成率与孵出率.结果：免疫组织化学结果显示,各组小鼠卵巢中卵母细胞及颗粒细胞上都检测到GDF9蛋白的表达,而BMP15仅在颗粒细胞上表达,卵母细胞未检测到BMP15蛋白的表达.经免疫印迹与PCR检测结果相对定量比较,提示GDF9和BMP15两种蛋白与mRNA在GnRH-a组,GnRH-ant组和PMSG组的表达均高于对照组.GnRH-a组与GnRH-ant组的表达又均低于PMSG组,而GnRH-a组与GnRH-ant组间表达无差异.与对照组相比,PMSG促排卵未影响小鼠2细胞胚胎形成率、囊胚形成率与孵出率,GnRH-a组与GnRH-ant组观察到其2细胞胚胎形成率、囊胚形成率与前述两组相比有所降低,囊胚孵出率未观察到差异.而GnRH-a组与GnRH-ant组两组间2细胞胚胎形成率、囊胚形成率和囊胚孵出率均无统计学差异.结论：在IVF中,应用GnRH激动剂与拮抗剂超促排卵均降低小鼠卵巢中GDF9和BMP15的表达,并影响卵子的发育潜能.
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