【摘 要】
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利用RNAiso Plus试剂盒提取紫苏总RNA,以其为模板采用RT-PCR方法扩增出紫苏DGAT1基因的cDNA编码区序列并构建克隆载体pMD-DGAT1,再将克隆载体pMD-DGAT1和pBI121空载体进行Xba
【机 构】
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大连工业大学生物工程学院,大连116034黑龙江省科学院大庆分院生物新技术研究所,大庆163319
【出 处】
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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会
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利用RNAiso Plus试剂盒提取紫苏总RNA,以其为模板采用RT-PCR方法扩增出紫苏DGAT1基因的cDNA编码区序列并构建克隆载体pMD-DGAT1,再将克隆载体pMD-DGAT1和pBI121空载体进行Xba I和BamH I双酶切,连接目的片段构建表达载体pBI121-DGAT1.克隆得到目的片段长度为1657bp,与GenBank中紫苏DGAT1基因序列的最大同源性为97％,所构建表达载体pBI121-DGAT1双酶切得到的两条片段长度与连接前一致,成功转化四尾栅藻并得到表达,转化后四尾栅藻的油脂含量较转化前提高近1倍.结果表明紫苏DGAT1基因克隆及四尾栅藻表达载体构建成功.。本研究成功构建DGAT1四尾栅藻表达载体，并达到了提高四尾栅藻油脂含量的应用效果，为开发高产油微藻新品种提供新方向，同时也为实现微藻生物柴油产业化生产提供充分的理论依据。
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