【摘 要】
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目的：为优化小型猪体细胞核移植技术(SCNT)技术,探讨供体细胞不同类型、不同传代数以及aphidicolin(蚜肠霉素,APC)处理各供体细胞对重构胚体外发育的影响。方法：小型猪输卵
【机 构】
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上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106
【出 处】
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2011东莞第二届国际小型猪学术论坛暨大型实验动物生物医药研究应用研讨会
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目的：为优化小型猪体细胞核移植技术(SCNT)技术,探讨供体细胞不同类型、不同传代数以及aphidicolin(蚜肠霉素,APC)处理各供体细胞对重构胚体外发育的影响。方法：小型猪输卵管上皮细胞(OEC),耳成纤维细胞(EFC)和卵丘细胞(CC)分别经血清饥饿或血饥饿后再使用0.1μg/ml APC处理。核移植重构胚体外培养4d,以检测其发育能力。结果：OEC经APC处理后,重构胚的卵裂率和囊胚形成均显著高于仅血清饥饿处理(61.82%vs56.25%,24.55%vs17.86%；P＜0.05)。以EFC为供体细胞,APC组重构胚卵裂率显著高于血清饥饿组(63.36% vs 57.01%；P＜0.05)。注入CC,APC处理能显著提高重构胚的囊胚率(29.63%：p＜0.05)。三种细胞经APC处理,CC作为核供体,重构胚的卵裂率和囊胚率最高。三种细胞中,无论哪一种作为核供体,其传代数对重构胚的发育没有影响。结论以CC为供体细胞,血清饥饿后再使用APC处理,更适合小型猪的体细胞核移植。
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