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目的 本研究主要观察黄芪多糖对体外培养毛囊干细胞增生及分化的调控作用,以进一步了解中药黄芪治疗脱发病的分子药理机制.方法 取7-8日龄Wistar大鼠,在放大镜下将触须毛囊从组织中分离出来,分离毛囊外根鞘及毛干,切去皮脂腺及毛囊中下段,保留Bulge区毛囊.将Bulge区毛囊置于含0.25％中性蛋白酶和0.1％胶原酶的混合消化液中,消化、离心最后加入KSFM制成单细胞悬液,运用Ⅳ型胶原蛋白粘附法分离毛囊干细胞,将分离得到的毛囊干细胞分为实验组a1-4(培养液中分别加入黄芪多糖50μg/ml、20μg/ml、10μg/ml、5μg/ml)及对照组b,未粘附细胞设为对照组c,对照组均不加入黄芪多糖,只加KSFM培养液,每天观察细胞增殖能力及形态学特征.共培养10d.运用K15、19及β1整合素单克隆抗体免疫组化鉴定培养细胞；用MTT法制作生长曲线,观察各组培养细胞生长规律和特性；计算克隆形成率,测定K15、K19、β1整合素阳性表达率,观察黄芪多糖对毛囊干细胞增生及分化的调控作用.结果 Ⅳ型胶原粘附细胞贴壁24h后细胞呈多角形生长,形态均一,核大,核仁明显,细胞器较少,分裂象明显,2-3天后细胞出现鸟巢状克隆,传代后细胞生长情况相似,免疫组化鉴定结果显示IV型胶原粘附细胞K15、K19及β1整合素阳性表达率分别为93.87±0.64％、96.89±0.49％、99.26±0.74％,符合毛囊干细胞特征.分组培养后,实验组(黄芪多糖组)及对照组细胞形态结构相似,实验组形成的克隆较早,克隆细胞数较多,加入黄芪多糖20μg/ml、10μg/ml作用最明显(p〈0.05).黄芪多糖组K15、K19、β1整合素阳性表达率及K19、β1整合素基因表达水平较对照组显著提高(p〈0.05),以加入黄芪多糖20μg/ml组最为明显.结论 黄芪多糖能促进毛囊干细胞增生及分化,中药黄芪促进毛发生长或治疗脱发病的机制可能与此相关.