【摘 要】
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目的：探讨microRNA-149-5p 对人皮肤创伤无瘢痕修复的作用,为microRNA 作为一种新型治疗手段应用于临床创伤修复提供科学理论基础.方法：通过高通量测序得到在人胚胎早中期(人孕28 周前)和晚期(人孕28 周后)皮肤组织中microRNA-149-5p 显著差异表达,并通过qRT-PCR 的方法对胚胎早中期和晚期的皮肤样本进行验证.并且通过双荧光素酶报告基因的方法验证microRN
【机 构】
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中国医科大学 教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室 干细胞与再生医学研究室,沈阳 110122
【出 处】
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第十届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议、第三届中欧创面修复学术会议、中国医师协会创伤外科医师分会创面修复医师专业委
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目的：探讨microRNA-149-5p 对人皮肤创伤无瘢痕修复的作用,为microRNA 作为一种新型治疗手段应用于临床创伤修复提供科学理论基础.方法：通过高通量测序得到在人胚胎早中期(人孕28 周前)和晚期(人孕28 周后)皮肤组织中microRNA-149-5p 显著差异表达,并通过qRT-PCR 的方法对胚胎早中期和晚期的皮肤样本进行验证.并且通过双荧光素酶报告基因的方法验证microRNA-149-5p 的靶基因.将外源性microRNA-149-5p 的mimics 转染人永生化表皮细胞系(HaCaT),观察其对HaCaT的生物学作用.以及通过与人真皮成纤维细胞共培养检测其对成纤维细胞增殖、迁移以及无瘢痕修复相关基因的表达的情况.结果：人胚胎早中期的皮肤样本中microRNA-149-5p 的表达为晚期的1.8 倍(p＜0.05),并且qRT-PCR 验证此结果.将microRNA-149-5p 与含有IL-1β 3UTR 的重组质粒报告载体共转染HaCaT,结果显示microRNA-149-5p 可以下调IL-1β 的表达.并且,过表达microRNA-149-5p 可以促进HaCaT 迁移,将转染microRNA-149-5p mimics 的HaCaT 通过与人真皮成纤维细胞共培养后,划痕实验证实且转染mimics 组可以促进成纤维细胞迁移；同时,qRT-PCR 检测到共培养后成纤维细胞中促进皮肤无瘢痕修复的TGFβ-3 和Collagen3表达量升高约1.5 倍(p＜0.05),α-SMA 表达量下降.结论：microRNA-149-5p 可以通过调控其靶基因IL-1β 的表达,而调控成纤维细胞无瘢痕修复相关因子的表达,从而参与皮肤创伤修复的过程.
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