【摘 要】
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过去研究表明,Leptin基因在糖尿病相关的血糖和脂肪代谢通路中起到重要作用,leptin突变小鼠模型被广泛用于肥胖疾病相关的药物测试.新的研究发现已有的leptin突变小鼠模型在患者临床糖尿病药物试验中,未能反映出治疗药物诱发心脏病的副作用.小型猪作为模型动物,与人类的脂肪积累方式和药物敏感度更接近.因此为了建立更适合人类肥胖症的疾病模型,本研究以小型猪为模式动物进行leptin基因敲除.本研究
【机 构】
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北京市海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼,100193
【出 处】
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第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会
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过去研究表明,Leptin基因在糖尿病相关的血糖和脂肪代谢通路中起到重要作用,leptin突变小鼠模型被广泛用于肥胖疾病相关的药物测试.新的研究发现已有的leptin突变小鼠模型在患者临床糖尿病药物试验中,未能反映出治疗药物诱发心脏病的副作用.小型猪作为模型动物,与人类的脂肪积累方式和药物敏感度更接近.因此为了建立更适合人类肥胖症的疾病模型,本研究以小型猪为模式动物进行leptin基因敲除.本研究基于基因定点修饰的新技术,如锌指酶或TALEN技术,实现leptin基因定点突变.再通过体细胞核移植技术,建立leptin基因敲除的克隆猪,并且借鉴人类和小鼠模型的临床检测手段进行各项生理生化指标的诊断.本研究旨在建立与人类亲缘关系更近的猪肥胖疾病模型,为提供动物模型用于疾病治疗、药物筛选等医学研究奠定基础.
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本文以绵羊为研究对象，用切剖法获得卵母细胞，收集卵丘细胞一卵母细胞复合体，进行成熟培养。COCs体外成熟19h后，去除周围卵丘细胞并将其离心洗涤，培养2代后用含有不同浓度Scriptaid的培养液进行接触抑制处理，然后用0.25％胰蛋白酶消化处理2-3min，用移液枪吹打成单个细胞。将卵母细胞在显微操作仪下去除第一机体及周围的少量胞质，并注入卵丘细胞，进行融合。随后置于培养液中培养3h后观察融合结
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