PDIA3介导JAWSII细胞免疫应答的研究

来源 :第二十六届全国中西医结合消化系统疾病学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:freebernie
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  背景 前期研究中,我们发现二硫键异构酶家族一员PDIA3 (protein disulfide-isomerase A3)在肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)大鼠的结肠黏膜组织中表达上调,而且在肠道树突状细胞中表达上调,提示PDIA3在DC中表达量的变化可能影响其免疫应答的发生.目的 探讨PDIA3低表达对JAWSII细胞免疫应答的影响.方法 采用shRNA(LV-PDIA3-RNAi)慢病毒和阴性对照病毒CON077转染小鼠未成熟树突状细胞株JAWSII,以嘌呤霉素筛选,构建PDIA3低表达组和阴性对照组JAWSII,正常组JAWSII不予转染干预.将3组细胞以终浓度为1μg/ml的LPS刺激24h,分别和脾脏来源淋巴细胞进行体外混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR).以q-PCR、Western Blot检测3组细胞的PDIA3基因和蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞表面标志CD86和MHCI1,Cell Trace CFSE细胞增殖试剂盒检测CD4+T/CD8+T细胞增殖,ELISA检测MLR体系中的细胞因子IL-4,IL-9.结果 PDIA3低表达JAWSII细胞与正常组和阴性对照组相比,PDIA3基因表达量(0.28±0.06 vs 1.00±0.07,0.91±0.03;P<0.01)和蛋白表达量(0.39±0.20 vs 0.91±0.07,1.02±0.10;P<0.05)均下降;LPS刺激后,细胞表面标记CD86和MHCII均上调.低表达组与正常组、阴性对照组相比较,CD4+T的MFI (26526.33±149.95 vs 26993.50±582.67,26554.67±474.09;P>0.05)和CD8+T的MFI (23949.67±311.51 vs 22831.67±430.00, 23189.17±688.95;P>0.05)均未见明显差异.MLR体系中,IL-4的分泌量(1.38±0.21 vs 2.59±0.39,2.44±0.77;p<0.05)降低,IL-9的分泌量(57.89±9.32 vs 53.24±7.35,61.47±9.15;P>0.05)未见明显差异.结论 shRNA慢病毒转染JAWSII细胞能成功建立稳定低表达PDIA3的细胞株,PDIA3低表达JAWSII能减少MLR体系中IL-4的分泌,提示其可能影响T细胞的分化,为进一步的研究提供实验依据.
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目的:研究中药六合丹和微米六合丹在急性胰腺炎大鼠的药动学-药效学。方法:20只大鼠分入健康组、急性胰腺炎组(AP),六合丹组(LHD)和微米六合丹组(MLHD)。六合丹外敷于大鼠腹部,不同时间点从尾静脉取血,运用液质联用测定血浆大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酸甲醚和大黄酚的浓度,并拟合药动学参数;外敷治疗48h后取血清和胰腺组织,测定血清淀粉酶、TNF-α,IL-6,和IL-10及胰腺组织病理积
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目的:(1)测定大承气汤十种主要单体在急性胰腺炎大鼠肺-肠组织分布及其浓度,以探讨大承气汤调节组织抗炎-促炎平衡在保护急性胰腺炎大鼠肺-肠损伤的剂量-浓度-效应关系.方法:1.大承气汤保护肺-肠损伤药动学研究:雄性SD大鼠30只,随机分为大承气汤低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只.造模采用改良牛磺胆酸钠(3.5%)逆行胰胆管注射法,造模后2h分别以生药浓度0.6g/ml、1.2g/ml、2.
目的:基于方剂组织药理学假说,以大黄为主的复方中药大承气汤、六合丹为主研究它们治疗急性胰腺炎的药效物质基础.方法:建立牛黄胆酸钠急性胰腺炎(AP)大鼠模型,分别给予健康大鼠和模型大鼠熟大黄、大承气汤、六合丹后,采集血浆以及心、肝、脾、肺、肾、胰腺等6个组织组织,采用HPLC-MS-MS方法分析测定血浆中中药、方剂成分及其浓度,比较不同组织内中药方剂成分谱及其浓度;测定血清炎症因子、胰腺腺泡细胞坏死
引言 急性重度有机磷中毒(ASOPP)是临床常见的急症,多数患者病情凶险,变化迅速,既往经积极的内科常规治疗,病死率仍然很高。其临床表现为瞳孔缩小、全身湿冷、大汗、流涎、呼吸困难、昏迷,全部患者血胆碱酯酶(ChE)活性<30%。笔者所处的地区为我国水果生产基地,有机磷农药大量使用,有机磷中毒患者相对较多,找出科学合理的救治方案就显得尤为重要。
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目的:研究幽门螺杆菌CagA(Helicobacterpylori cagA,Hp cagA)促进胃癌AGS细胞侵袭转移的机制,并探讨温郁金正丁醇提取物(Curcuma Wenyujin n-Butyl alcohol extract,CWNAE)的干预作用及机制.方法:MTT试验筛选无毒浓度的CWNAE.将CagA+/-的Hp分另与胃腺癌细胞AGS共培养,同时设立对照组及CWNAE干预组,48h
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目的:评估食管微小病变对于胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)的诊断意义,探讨其临床特点.方法:2013年5月至2013年9月于我院内镜检查发现黏膜有粗糙或白色分泌物附着、红斑、水肿、脆性增加,齿状线模糊或呈锯齿状、栅栏状血管模糊六大微小病变表现者(M级)和糜烂性反流性食管炎者(洛杉矶分级A、B、C、D级);行GERDQ问卷调查及相关病史采集,以
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肠易激综合征(IBS)是临床常见的以腹痛、腹胀、排便习惯和大便性状异常为特征的一种胃肠道功能紊乱性疾病.IBS的发病机制尚未完全明了,温度、机械、化学等刺激等均可诱导IBS的发病,而温度敏感性受体—TRP通道的发现,为研究肠易激综合征提供了新的思路,本文就温度刺激、TRP受体与IBS的关系及其机制作一综述.