【摘 要】
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目的:通过将已构建的靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P／VAX免疫小鼠,研究DNA疫苗与宿主组织细胞基因组有无整合现象。方法:将100只Balb／c小鼠（6-8周）随机分为6组,雌雄各半。分别为质粒pGJA-P／VAX免疫组,pVAX空载体免疫组和 PBS对照组,各组分别采用股四头肌及颌下腺两种途径免疫,并于加强免疫后的1天、7天、1月、2月、3月分离小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、脑、胃肠、股四头
【机 构】
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2007年第七次全国牙体牙髓病学学术会议论文集
【出 处】
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2007年第七次全国牙体牙髓病学学术会议论文集
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目的:通过将已构建的靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P／VAX免疫小鼠,研究DNA疫苗与宿主组织细胞基因组有无整合现象。方法:将100只Balb／c小鼠（6-8周）随机分为6组,雌雄各半。分别为质粒pGJA-P／VAX免疫组,pVAX空载体免疫组和 PBS对照组,各组分别采用股四头肌及颌下腺两种途径免疫,并于加强免疫后的1天、7天、1月、2月、3月分离小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、脑、胃肠、股四头肌、肾脏、颌下腺、性腺（睾丸或卵巢）、血液、胸腺12种组织器官,通过半定量PCR方法检测疫苗的分布;以空白对照组织基因组DNA为模板,通过加入不同梯度拷贝数的pGJA-P／VAX,确定PCR反应敏感性;同时以实验组12种组织基因组DNA为模板,检测pGJA-P／VAX的整合率。结果:免疫1天后,几乎在所有的组织都能检测到疫苗DNA,肌肉组织中疫苗DNA的含量显著高于其他组织,随时间推移,含量逐渐减少,3个月后仅注射部位附近的组织有少量质粒残留; 本实验PCR体系的检测水平为:在1μg基因组DNA中能检测出20拷贝的pGJA-P／VAX;在此检测水平下,实验组12种组织基因组DNA未发现整合。结论:在不超过20拷贝的整合概率下,尚未发现该疫苗整合入宿主细胞基因组DNA的证据。
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