【摘 要】
：
多胺(polyamines,PA)包括腐胺(putrescine,Put),亚精胺(spermidine,Spd)和精胺(spermine,Spm),是一类普遍存在于细胞内能促进细胞生长与分化的小分子化合物.研究表明,多胺含量与肿瘤细胞增殖及细胞恶变密切相关,因此,通过干扰正常的多胺代谢途径,改变肿瘤细胞中多胺的含量,可有效地发挥抗肿瘤效应.多胺的生物合成始于鸟氨酸的脱羧基反应,鸟氨酸在鸟氨酸脱羧
【机 构】
：
三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室 湖北宜昌443002
【出 处】
：
中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议
论文部分内容阅读
多胺(polyamines,PA)包括腐胺(putrescine,Put),亚精胺(spermidine,Spd)和精胺(spermine,Spm),是一类普遍存在于细胞内能促进细胞生长与分化的小分子化合物.研究表明,多胺含量与肿瘤细胞增殖及细胞恶变密切相关,因此,通过干扰正常的多胺代谢途径,改变肿瘤细胞中多胺的含量,可有效地发挥抗肿瘤效应.多胺的生物合成始于鸟氨酸的脱羧基反应,鸟氨酸在鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)的催化下脱羧形成腐胺,ODC 是多胺生物合成的关键限速酶.已经有研究证实,ODC 在许多实体性肿瘤中,如肺癌、乳腺癌、大肠癌、前列腺癌、黑色素瘤等中活性均高于正常组织,因此成为当前抗肿瘤药物设计新的分子靶点.二氟甲基鸟氨酸(DFMO)是一种ODC不可逆抑制剂,但是由于其使用剂量高和毒副作用大限制了它在抗肿瘤治疗中的应用.因此本课题组希望研发出更高效且毒副作用小的新型ODC 抑制剂.前期我们课题组已经通过综合应用计算机模拟高通量筛选和分子、细胞水平上的实验,从小分子化学库中筛选出一批能够抑制ODC 活性的小分子化合物.首先通过计算机分析获得ODC 催化活性中心的空间构象,应用计算机模拟技术从小分子化学药物库中(含20 余万个化学分子)高通量筛选出90 个小分子化合物；随后应用MTT、RTCA、细胞形态学检测小分子化合物对人肺腺癌A549 细胞增殖能力的影响,发现其中5 个小分子化合物能够显著抑制A549 细胞生长,其中以D24 号药物效果最明显；接着成功克隆并构建人ODC 原核表达质粒,表达及纯化出人ODC 蛋白,以此蛋白为基础建立筛选ODC 抑制剂的实验技术；发现小分子化合物D24 在低浓度下(IC50=8.355uM)能够显著抑制ODC 酶活性；同时D24 能与ODC 高亲和性结合,其结合能力显著性高于对照药物DFMO.以上这些前期研究证实,小分子化合物D24 是一种比DFMO 更高效的ODC 抑制剂,有望成为前景较好的抗肿瘤药物.为了进一步研究D24 在活体内的效应,将肺腺癌A549 细胞悬液接种于裸鼠皮下,待移植瘤形成后,经腹腔注射注入高中低浓度D24 干预,并设阳性对照组和溶剂对照组观察裸鼠成瘤时间、肿瘤大小体积、裸鼠生长状态情况.并取出肿瘤组织用TUNEL 法检测细胞凋亡情况、Western Blot 检测ODC 表达情况以及RT-PCR 检测ODCmRNA 的表达情况.以此来观测D24 在活体内是否具有像分子水平实验一样的高效的抗肿瘤效应.
其他文献
ASPNJ(Acidic Serine Protease from Neanthes japonica)was first isolated and purified from Neanthes japonica in our lab.ASPNJ has both strong plasmin and proteolytic enzyme activities.The effects of ASP
Ethyl maltol and iron complexes are products of ethyl maltol and the iron found in the cooking pots used to prepare the Chinese dish,hot-pot.Because their safety is undocumented,the toxicity study of
Molecular imaging is an important topic which has draw significant attention in the fields of chemical biology and diagnosis of disease.CD22 is a 140kDa transmembrane sialo-adhesion protein highly exp
This study investigates the antibacterial effects of the endophtic fungi producing naringenin and the mechanism on Staphylococcus aureus.A fungal endophyte P5 with obvious antibacterial activities was
Due to the specific molecular recognization between bases,DNA has shown wonderful ability to create nanoscale structures from bottom up.With DNA it is possible to design and build two-and three-dimens
Homologous recombination(HR)is one of major mechanisms that repair DNA double strand breaks(DSBs)and helps maintain genome stability.Many genes involved in HR contribute to hereditary and spontaneous
Calcineurin B(CNB)is the regulatory subunit of Calcineurin(CN),which is the only known Ca2+/calmodulin-dependent serine/threonine protein phosphatase.We founded its anticancer function.We got CNB by t
NDRG2,a member of the N-myc downstream-regulated gene family,was first cloned in our laboratory and is regarded as a tumor suppressor gene that is transcriptionally repressed by c-Myc.It has been show
猪圆环病毒2 型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征的主要病原.PCV2-Cap 是病毒的主要免疫保护性抗原，是研制基因工程亚单位疫苗的理想靶抗原.口蹄疫病毒(FMDV)是感染偶蹄目动物的重要病原.FMDV 衣壳蛋白VP1为病毒的主要免疫原性蛋白，能够诱导机体产生中和抗体.研究表明，利用重组蛋白研制的亚单位疫苗对PCV2和FMDV 感染具有良好的免疫效果，因此研制同时预防这两种病毒性疫病的二
Asymmetric cell division(ACD)is an evolutionarily conserved division mode used by stem and progenitor cells to create two daughter cells with distinct fates.Typically,one daughter cell retains self-re