【摘 要】
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目的 观察重组人核心蛋白聚糖(rhDCN)对白血病K562细胞生长抑制、凋亡的影响,并探讨可能的作用机制.方法 通过LipofectamineTM2000脂质体介导转染对数生长期的白血病K562细胞,试验分组为0.9%NaCl溶液组、pcDNA3.1 (+)/K562组、pcDNA3.1(+)-DCN/K562组和脂质体组.经瑞氏染色观察转染后细胞形态的改变,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪分
【机 构】
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山西医科大学第二医院检验科,太原 030001 太原市中心医院心内科,太原,030009
【出 处】
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第6届中国医师协会全国检验与临床学术会议暨国际检验与临床高峰论坛
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目的 观察重组人核心蛋白聚糖(rhDCN)对白血病K562细胞生长抑制、凋亡的影响,并探讨可能的作用机制.方法 通过LipofectamineTM2000脂质体介导转染对数生长期的白血病K562细胞,试验分组为0.9%NaCl溶液组、pcDNA3.1 (+)/K562组、pcDNA3.1(+)-DCN/K562组和脂质体组.经瑞氏染色观察转染后细胞形态的改变,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪分析细胞凋亡,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白BCL-XL、Mcl-1及Bax的表达.结果 pcDNA3.1 (+)-DCN/K562组瑞氏染色呈现典型的凋亡形态学改变,MTT结果显示,pcDNA3.1(+)-DCN/K562组细胞增殖抑制率(转染24h为16±1.08%,转染48h为14±1.01%,转染72h为20±1.19%)明显高于对应时间点其他组增殖抑制率,差别有统计学意义(P<0.05);FCM检测结果显示,pcDNA3.1(+)-DCN/K562组凋亡率(20.15±1.31%)、细胞的G0/G1期细胞百分率(51.15±0.57%)与其他各组结果比较增加明显,差别有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示pcDNA3.1(+)-DCN/K562组与其他各组比较BCL-XL、Mcl-1蛋白表达减低,Bax蛋白表达升高.结论rhDCN重组质粒可有效抑制K562细胞增殖,并诱导其凋亡,rhDCN对细胞周期及凋亡相关蛋白BCL-XL、Mcl-1、Bax的影响可能是其发挥作用的机制,为白血病生物治疗提供了新的实验依据.
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