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目的:婴儿型双歧杆菌灌胃BALB/c鼠,研究不同剂量双歧杆菌对小鼠肠系膜淋巴结(MLN)内T细胞相关细胞因子表达、Treg与Th17细胞亚群的影响;对双歧杆菌灌胃鼠进行TNBS/50%乙醇溶液灌肠诱导肠道炎性疾病(IBD),进一步了解其对小鼠IBD模型的影响,为探讨婴儿型双歧杆菌对IBD可能的干预作用提供理论依据。方法:通过x-gal显色培养基+PCR的方法对双歧杆菌进行鉴定,不同剂量婴儿型双歧杆菌喂养BALB/c鼠20d, Real-time PCR检测小鼠MLN内T细胞相关细胞因子的表达,流式细胞术检测MLN内Treg与Th17细胞数目;对双歧杆菌灌胃小鼠进行TNBS/50%乙醇溶液灌肠诱导IBD,灌肠后第6d,通过 Real-time PCR检测小鼠MLN内T细胞相关转录因子及细胞因子的表达,病理切片观察结肠病理改变。结果:1.双歧杆菌接种于x-gal-BBL琼脂培养基,形成圆形、蓝色菌落,镜检为革兰阳性,呈双排列的短杆菌。菌落PCR产物经琼脂糖凝胶电泳在1428bp处出现双歧杆菌属特异性条带。2.100mg婴儿型双歧杆菌冻干菌粉灌胃后,小鼠MLN内Th1相关细胞因子(IL-2、IFN-γ、IL-12p40)、Th17相关转录因子及细胞因子( RORγt、IL-21、IL-23)、Treg相关转录因子及细胞因子(Foxp3、IL-10)表达增加,其中IL-2、IL-12p40、 RORγt、IL-23、Foxp3和IL-10增加有统计学意义(P<0.05)。10mg婴儿型双歧杆菌冻干菌粉灌胃后,小鼠MLN内T细胞相关细胞因子表达无明显改变。3.100mg婴儿型双歧杆菌冻干菌粉灌胃后,流式细胞术检测小鼠MLN内CD4+Foxp3+Treg及CD3+CD4+IL-17A+Th17细胞比例均有增加趋势。4.双歧杆菌灌胃-TNBS/50%乙醇溶液灌肠组与PBS灌胃-TNBS/50%乙醇溶液灌肠组比较,小鼠MLN内Th1相关转录因子及细胞因子(T-bet、IL-2、IFN-γ、IL-12p40)、Th17相关转录因子 RORγt及细胞因子IL-17A、Treg相关转录因子Foxp3及细胞因子IL-10表达下降,Th2相关细胞因子IL-4表达增加。5.病理切片显示,双歧杆菌灌胃-TNBS/50%乙醇灌肠组较PBS灌胃-TNBS/50%乙醇灌肠组病变部位结肠炎细胞浸润减少。结论:1.通过x-gal显色培养基+PCR的方法可以对双歧杆菌进行快速鉴定。2.婴儿型双歧杆菌灌胃在肠系膜淋巴结局部诱导Th1和Th17型反应,适度促进Th17细胞产生而维持肠道免疫的平衡。3.婴儿型双歧杆菌可通过调节T细胞亚群分化和细胞因子表达而缓解IBD病情。