【摘 要】
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目的:探讨阿魏酸对红藻氨酸诱导PC12细胞凋亡的保护作用机制.方法:采用50.0μmol.L-1KA诱导PC12细胞凋亡建立AD神经细胞模型,然后将处理后的PC12细胞分为KA模型组和KA+阿魏酸(25.0,50.0,100.0μmol.L-1)处理的低、中、高剂量组,同时设立正常对照组.采用MTT比色法检测PC12细胞的存活率;采用免疫细胞化学法观察PC12细胞中凋亡蛋白Bcl-2、Bax和Cy
【机 构】
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安徽大学生命科学学院,安徽省中药研究与开发重点实验室,安徽 合肥 230601 安徽医科大学第一临
【出 处】
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2013中国药学大会暨第十三届中国药师周
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目的:探讨阿魏酸对红藻氨酸诱导PC12细胞凋亡的保护作用机制.方法:采用50.0μmol.L-1KA诱导PC12细胞凋亡建立AD神经细胞模型,然后将处理后的PC12细胞分为KA模型组和KA+阿魏酸(25.0,50.0,100.0μmol.L-1)处理的低、中、高剂量组,同时设立正常对照组.采用MTT比色法检测PC12细胞的存活率;采用免疫细胞化学法观察PC12细胞中凋亡蛋白Bcl-2、Bax和Cyt c的表达;膜联蛋白-Ⅴ,PI双染流式细胞仪检测PC12的细胞凋亡率,蛋白免疫印记技术检测PC12细胞中Bcl-2、Bax和Cyt c的表达水平.结果:MTT法和凋亡蛋白表达检测显示,与正常组相比,模型组PC12细胞的存活率明显下降,且细胞中Bcl-2表达减少(P＜0.01),而Bax和Cyt c表达升高,Bcl-2/Bax比值下降(P＜0.01),流式细胞检测细胞的凋亡率显示,模型组细胞的凋亡率显著上升(P＜0.01).蛋白印迹术检测显示,模型组细胞中Bcl-2表达量减少,Bax和Cyt c表达量升高,与正常组比较,差异极显著(P均＜0.01).当采用阿魏酸干预后,与模型组相比,25.0,50.0,100.0μmol.L-1组细胞的存活率明显上升,细胞凋亡率减少,而且能增加Bcl-2阳性百分率和表达水平,明显减少Bax和Cyt c阳性百分率和表达水平,使Bcl-2/Bax比值增加 (P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).结论:KA在50.0μmol.L-1剂量时可明显诱导PC12发生凋亡,阿魏酸在25.0～100.0μmol.L-1剂量时能显著抑制KA诱导的PC12细胞凋亡,其神经保护机制可能是通过抑制Bax和Cyt c的表达,升高Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值,从而阻断内源性细胞凋亡通路而提高神经细胞的存活率.
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