【摘 要】
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猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性胃肠道传染病,其临床特点为急性呕吐和严重腹泻,可导致新生仔猪的高死亡率.世界各地区PED广泛流行,经济损失影响重大.M蛋白是PEDV主要结构蛋白之一,具有高度保守性,是PEDV刺激机体产生免疫保护的重要蛋白之一,决定病毒粒子的装配位点、病毒成熟及出芽位点.另外,抗M蛋白抗体在补体存在的情况下可中和病毒感染活性.所以M蛋
【机 构】
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东北农业大学动物医学学院,黑龙江 哈尔滨 150030 东北农业大学电气与信息学院,黑龙江哈尔滨
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会
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猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性胃肠道传染病,其临床特点为急性呕吐和严重腹泻,可导致新生仔猪的高死亡率.世界各地区PED广泛流行,经济损失影响重大.M蛋白是PEDV主要结构蛋白之一,具有高度保守性,是PEDV刺激机体产生免疫保护的重要蛋白之一,决定病毒粒子的装配位点、病毒成熟及出芽位点.另外,抗M蛋白抗体在补体存在的情况下可中和病毒感染活性.所以M蛋白特性研究对揭示PEDV感染机制及该病的综合防治有重要的意义.本文成功构建PEDV M蛋白的阳性重组表达质粒pET-32a-PEDV-M，将其在大肠杆菌表达系统中进行诱导表达，融合蛋白大小约为41ku，与预期大小相符。以表达纯化复性后的M蛋白作为靶蛋白，利用噬菌体展示随机十二肽库进行筛选，4轮淘选后，挑选10个与PEDV M蛋白特异性结合力高的噬菌体单克隆，序列测定并推导其氨基酸序列为AGWYCTEVLCV和AYCTRHVCYLDN，分别命名为M-2、M-9多肽。合成多肽的体外抗病毒试验中，间接免疫荧光和实时荧光定量PCR实验证明M-2、M-9及M-2与M-9多肽联合与PEDV作用都能够有效抑制病毒的复制，且都呈剂量依赖性。其中M-2多肽抑制病毒作用比M-9多肽高，两种多肽联合抗病毒作用最好。
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