TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞调控作用的研究

来源 :2010中华医学会第七次全国医学美学与美容学术年会暨第三届两岸四地美容医学学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liang672369282
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目的:探讨TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞的具体调控作用及其机制。 方法:将原代分离培养并经过鉴定的小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 KO型)分为六组:野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB 431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Smad 3 KO FB组和Smad3 KO FB+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后,直接以TGF-β1刺激或经SB 431542预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞抽提总RNA,以实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1、Smad 3、PCNA、MMP 2、MMP 9和TIMP-1的变化情况,细胞培养液上清经离心超滤浓缩后进行明胶酶谱分析,检测MMP-2和MMP-9的活性。 结果:TGF-β1促进成纤维细胞中TGF-β1、Smad3、PCNA、MMP 2、MMP 9的表达,抑制TIMP-1表达;抑制Smad 3可显著增加MMP 2和MMP 9的表达并降低TIMP-1表达。 结论:Smad 3抑制TGF-β1的自身正反馈,参与促进成纤维细胞增殖的信号途径,同时还对MMP 2/9的表达起负向调控作用而对TIMP—1起正向调控作用。
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