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目的:建立高效液相色谱法测定胸腺肽α1的氨基酸组成。
方法:采用OPA试剂柱前衍生法测定氨基酸组成。色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse AAA(4.6*150mm,3.5μm),流动相:A相为40mmol/L磷酸氢二钠的水溶液,pH7.2,B相为甲醇∶乙腈∶水=45∶45∶10,采用梯度洗脱,流动相B在17min内从0%升至57%;流速:2.0ml·min-1;检测波长:338nm。
结果:高效液相色谱法测定各氨基酸的线性范围为0.1~5μmol/ml,r=0.999,本方法重复性和精密度良好(RSD<2%)。
结论:高效液相色谱法测定胸腺肽α1的氨基酸组成,方法简便,结果准确。