【摘 要】
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目的：探讨针对survivin基因的siRNA对肿瘤细胞的效应,筛选有效的siRNA序列,为进一步研制具有自主知识产权的RNAi药物奠定实验基础.方法：设计3条针对survivn基因的siRNA,用脂质体转染试剂HiperFect将其转染至人类肺腺癌A549细胞、宫颈癌Hela S3细胞、急性髓系白血病K562细胞.采用SYBR Green 1荧光染料的实时定量PCR研究survivin siRN
【机 构】
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首都儿科研究所附属儿童医院血液科 100020
【出 处】
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中华医学会第十八次全国儿科学术会议
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目的：探讨针对survivin基因的siRNA对肿瘤细胞的效应,筛选有效的siRNA序列,为进一步研制具有自主知识产权的RNAi药物奠定实验基础.方法：设计3条针对survivn基因的siRNA,用脂质体转染试剂HiperFect将其转染至人类肺腺癌A549细胞、宫颈癌Hela S3细胞、急性髓系白血病K562细胞.采用SYBR Green 1荧光染料的实时定量PCR研究survivin siRNA对肿瘤细胞survivin基因表达的影响,采用WST-8细胞计数试剂盒(水溶性四唑盐)研究siRNA对肿瘤细胞增殖的影响.结果用统计学软件PASW statistics 18,进行单因素方差分析和LSD法两两比较,检验水准以P＜0.05为具有统计学差异.结果：本研究设计的3条survivin siRNA序列对肿瘤细胞A549、Hela S3和K562中survivin基因表达的抑制率达57％-95％,对三种肿瘤细胞增殖的抑制率达27％-57％.其中序列1的效应最为显著:对survivin基因的抑制率48h达到75％以上、72h达到90％以上;对细胞增殖抑制率48h可达40％以上、72h可达50％以上,并且在3个肿瘤细胞系中效应大致相同.结论：siRNA能有效沉默survivin基因在多种肿瘤细胞中的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,所设计的三种survivin siRNA序列均有活性以序列1作用最强.
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